文档介绍:月季的花药培养基础知识: (一)、被子植物的花粉发育(二)、产生花粉植株的两条途径(三)、影响花药培养的因素被子植物的花粉发育雄蕊: 花丝花药:囊状结构,内有很多花粉粒花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期注意: ①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成) ②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。③两个精子和一个营养核的基因型相同。④1花粉母细胞 4个小孢子减分有分 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核有分 8个精子产生花粉植株的两条途径花粉花粉胚状体愈伤组织从芽从芽生根移栽脱分化分化再分化诱导人工种子又称人造种子、合成种子或无性种子, 就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体,包裹在能提供营养的胶囊(人造胚乳)里,再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜( 人造种皮),造成一种类似种子的结构,能在一定的条件下萌发生长,形成完整植株。影响花药培养的因素一、材料的选择: 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般,月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。培养基的组成小麦中为 N6 ,马铃薯、月季中为 MS ,油菜中为 B5 培养基实验操作一、材料的选取二、材料的消毒三、接种和培养(一)材料的选取选择花药时,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有醋酸洋红法。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。(二)材料的消毒 1、花蕾用 V/V 为 70% 的酒精浸泡 30 秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为 % 的***化***溶液中 2~4 分钟(也可质量分数为 1% 的次***酸钙溶液或饱和漂白粉溶液) 5、无菌水冲洗 3~5 次用于培养花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。