文档介绍:第五章 吸 光 光 度 法
§ 吸光光度法的基本原理
§ 光度分析的方法和仪器
§ 吸光光度法的灵敏度与准确度
§ 显色反应与分析条件的选择
§ 吸光光度法的应用
Date
1
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化学分析:常量组分(>1%), Er %~%
依据化学反应, 使用玻璃仪器
化学分析与仪器分析方法比较
仪器分析:微量组分(<1%), Er 1%~5%
据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器
例: %的样品, , 则m(Fe)≈
重量法 m(Fe2O3)≈, 称不准
容量法 V(K2Cr2O7)≈, 测不准
光度法 %~%, 满足要求
准确度高
灵敏度高
Date
2
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§ 吸光光度法的基本原理
特点
灵敏度高:测定下限可达10-5~10-6mol/L,
或10-4%~10-5%
准确度能够满足微量组分的测定要求:
相对误差2~5% (1~2%)
操作简便快速
应用广泛
吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。
Date
3
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远紫外
近紫外
可见
近红外
中红外
远红外
(真空紫外)
10nm~200nm
200nm ~380nm
380nm ~ 780nm
780 nm~ m
m ~ 50 m
50 m ~300 m
Date
4
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二. 溶液中溶质分子对光的吸收与吸收光谱
/nm
吸收光的颜色
互补光(物质的颜色)
400-450
紫
黄绿
450-480
蓝
黄
480-490
绿蓝
橙
490-500
蓝绿
红
500-560
绿
红紫
560-580
黄绿
紫
580-610
黄
蓝
610-650
橙
绿蓝
650-760
红
蓝绿
不同颜色的可见光波长及其互补光
Date
5
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二. 溶液中溶质分子对光的吸收与吸收光谱
Date
6
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300
400
500
600
700
/nm
350
525 545
Cr2O72-
MnO4-
Absorbance
Cr2O72-、MnO4-的吸收光谱
350
Date
7
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苯(254nm)
甲苯(262nm)
A
/nm
230 250 270
苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱
Date
8
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吸光度与光程的关系 A = K1b(朗伯1760年)
光源
检测器
吸光度
检测器
b
样品
光源
吸光度
光源
检测器
吸光度
b
样品
b
样品
c
c
c
三. 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律
Date
9
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吸光度与浓度的关系 A = K2c (比尔1852年)
吸光度
光源
检测器
吸光度
光源
检测器
b
吸光度
光源
检测器
b
2C
C
Date
10
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