文档介绍：植物学基本实验技术
显微镜的构造和使用
植物制片法
显微测量技术
显微镜的构造和使用
一、显微镜的构造
 主要部分:目镜和物镜; 辅助部分:镜座、镜柱、镜臂、载物台、聚光照明系统、镜筒、转换器及粗、细准焦螺旋。
载物台用于承放被观察的物体。利用调焦旋钮可以驱动调焦机构,使载物台作粗调和微调的升降运动,使被观察物体调焦清晰成象。它的上层可以在水平面内沿作精密移动和转动,一般都把被观察的部位调放到视场中心。
聚光照明系统由灯源和聚光镜构成。
物镜位于被观察物体附近,是实现第一级放大的镜头。在物镜转换器上同时装着几个不同放大倍率的物镜,通常为5~100倍。
物镜对成象质量优劣起决定性作用。常用的有能对两种颜色的光线校正色差的消色差物镜;质量更高的还有能对三种色光校正色差的复消色差物镜;能保证物镜的整个像面为平面,以提高视场边缘成像质量的平像场物镜。高倍物镜中多采用浸液物镜,,它能显著的提高显微观察的分辨率。目镜是位于人眼附近实现第二级放大的镜头,放大倍率通常为5~20倍。按照所能看到的视场大小,目镜可分为视场较小的普通目镜,和视场较大的大视场目镜(或称广角目镜)两类。
显微镜的构造和使用
1 目镜 2 镜筒 3 物镜 4 聚光器 5 反光镜 6 镜座 7 倾斜关节 8 镜台 9 执手 10 镜头转换器 11 细聚光器 12 粗聚光器
显微镜的构造和使用
载物台和物镜两者必须能沿物镜光轴方向作相对运动以实现调焦,获得清晰的图像。用高倍物镜工作时,容许的调焦范围往往小于微米,所以显微镜必须具备极为精密的微动调焦机构。
显微镜放大倍率的极限即有效放大倍率,显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的最小间距。分辨率和放大倍率是两个不同的但又互有联系的概念。当选用的物镜数值孔径不够大,即分辨率不够高时,显微镜不能分清物体的微细结构,此时即使过度地增大放大倍率,得到的也只能是一个轮廓虽大但细节不清的图像,称为无效放大倍率。反之如果分辨率已满足要求而放大倍率不足,则显微镜虽已具备分辨的能力,但因图像太小而仍然不能被人眼清晰视见。所以为了充分发挥显微镜的分辨能力,应使数值孔径与显微镜总放大倍率合理匹配。
聚光照明系统是对显微镜成像性能有较大影响,但又是易于被使用者忽视。它的功能是提供亮度足够且均匀的物面照明。聚光镜发来的光束应能保证充满物镜孔径角,否则就不能充分利用物镜所能达到的最高分辨率。为此目的,在聚光镜中设有可以调节开孔大小的可变孔径光阑来调节照明光束孔径,以与物镜孔径角匹配。改变照明方式,可以获得亮背景上的暗物点(称亮视场照明)或暗背景上的亮物点(称暗视场照明)等不同的观察方式,以便在不同情况下更好地发现和观察微细结构。
二、显微镜使用方法步骤
  (一)取镜和安放:右手握住镜臂,左手托住镜座。把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘5厘米左右处)。
(二)对光:转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后同时画图)。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜,可以看到白亮的视野。
(三)观察:把所要观察的玻片标本安放标本时,应将有盖玻片的一面朝上放置,并用片夹夹紧。注意标本要安放平整,标本要正对通光孔的中心。转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。油镜使用:在用40倍物镜调焦清晰后,移开40倍物镜,在标本上光斑位置滴一滴香柏油,再让90~100倍物镜准确进入光路。此时,应轻微转动转换器,驱除香柏油中的气泡,以免影响观察效果。观察完毕,应即刻用镜头纸蘸上二甲苯或工业纯酒精与乙醚的混合液(混合比3:7)擦拭干净。
显微镜的构造和使用
三、显微镜使用的注意事项
,另一只手托住镜座,并使显微镜与地面垂直,水平移动。
,应将镜子放在身体略偏左侧(左胸前)的实验台上,且距实验台边缘5cm左右,不可太靠边缘,以防止显微镜滑落。
,低倍物镜的前端与载物台的距离最好是2cm,不要太高,也不要太低。
,视野必须达到白亮。这样,要用最大的光圈对准通光孔,反光镜最好用凹面镜。
,同时右眼睁开,便于以后画图。
,先使镜筒下降,接近玻片标本约3~4mm,此时眼睛注视物镜;而后左眼注视目镜,反向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓慢上升直到看清物像。
,所以要想将视野左上方的物