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土壤微生物研究土壤采集方法样稿.doc

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土壤微生物研究土壤采集方法样稿.doc

上传人:梅花书斋 2020/11/17 文件大小:40 KB

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文档介绍

文档介绍:土壤微生物研究规范——II. 土壤样品运输和贮存
1. 土壤微生物样品运输
土样从采集点到试验室往往需要经历一定时间运输,土样运输过程中难免影响土壤温度、水分、氧气等环境条件,所以要立即置于黑暗、低温(4℃)密闭环境,尽可能维持土壤含水量稳定不变,黑暗环境是为了避免光照下藻类在土壤表明生长,低温是为了降低细菌繁殖,维持微生物区系稳定。通常装于聚乙烯袋子,并松扎。另外,储存时尽可能避免物理压实,样品袋不要堆叠过多,以免破坏土壤原有团粒结构,并造成底层样品处于厌氧环境。
微生物取样土壤样品需要在0-4℃条件下保留,所以土壤样品应立即保留在保温箱或冰箱中(设置0-4℃),并最好在一周内完成前期处理。
假如采集地有冰箱、熏蒸所需真空干燥器和通风橱等设施,提议将微生物土壤样品熏蒸浸提后,以冷冻浸提液保留在塑料小瓶中,以方便运输。
假如采集地没有通风橱等设施,提议将所取土壤样品过筛后冷藏在保温箱中,以方便运输。具体步骤以下:
(1)提前准备好保温箱及冷冻好冰板。冰板需要提前1-2 d冷冻,能够再用自封袋装一定量水分放平冷冻为规则冰块备用。
(2)根据微生物取样规范进行取样,立即过筛去除根系、土壤动物等杂质,放置在0-4℃保鲜冰箱中保留。用于DNA或RNA分析土壤样品应用干冰速冻。用于RNA分析土壤样品在运输过程中应用干冰保持低温。用于DNA分析土壤样品应用冰盒运输,也可用干冰。
(3)运输当日将土壤样品密封好,放入保温箱中,保温箱底部、四面及顶部均放置冰板和用自封袋密封冰块,确保样品四面均可接触冰板或冰块。注意确保土壤样品和冰块分别密封,以防路途中融化水分进入土壤样品造成污染。
(4)抵达目标地后,快速将样品放入保鲜冰箱(0-4℃)保留待测。
假如采样地条件许可,能够依据规范上试验方法,将样品熏蒸、浸提后保留在塑料小方瓶中,-20℃冷冻,然后再根据上述步骤放置保温箱中运输到目标地,快速放置在冷冻冰箱中(-20℃)保留待测。
假如购置不到保温箱,能够选择运输水果、蔬菜等白色泡沫箱,密封严实后亦可。因为泡沫箱保温效果可能不及保温箱,路途较远时应多放置冰板及冰块,途中尽可能不要打开,放入及取出全部要立即,且需要提前确定样品采集地和目标地冰箱是否留有足够空间存放土壤样品或浸提液样品。
尤其要注意微生物样品密封,放置融化水分或其它污染源污染样品。
2. 土壤微生物样品处理
采样后土壤样品应立即处理手工过筛。过筛之前,去除样品中植物、可见土壤动物和石粒等。推荐过2 mm筛,促进颗粒间气体交换,以利于保持土壤好氧状态,也能去除小石头、动物和植物碎片。部分有机物质如粗腐殖质或泥炭不轻易经过2 mm筛,此时应在潮湿条件下过5 mm筛。假如土壤太湿不能过筛,应该将其摊开,置于轻微流动空气中,促其均匀风干。应不停地用手指捏碎并翻动土壤以免表面过分干燥,通常在室温下进行上述操作。假如土壤需要风干,不要过分风干,风干程度达成过筛要求即可。
3、土壤微生物样品储存
土壤微生物样品管理和制备过程相对特殊,所以对土壤微生物样品在试验室内分析阶段储存需要尤其注意对储存条件和储存时间控制,以确保检测结果正确。
微生物样品储存条件
依据土壤微生物观察指标、样品状态等不一样,对样品储存条件要求以下:
1)微生物生物量分析通常要求土壤鲜样置于4℃左右