文档介绍：一、 细胞培养试验室设置及设备
（一）细胞培养试验室设置
组织细胞培养技术和其它通常试验室工作关键区分在于要求保持无菌操作，避免微生物及其它有害原因影响。现在，超净工作台广泛使用，很大程度上方便了组织细胞培养工作，并使部分常规试验室有可能用于进行细胞培养。
细胞培养试验室应能进行六方面工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
1．无菌操作区
（1）无菌操作室：无菌操作区只限于细胞培养及其它无菌操作区域，最好能和外界隔离，不能穿行或受其它干扰。
理想无菌操作室应划为三部分：
a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 缓冲间—―在更衣间和操作间之间，目标是为了确保操作间无菌环境，同时可放置恒温培养箱及一些必需小型仪器。
c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要合适，且其顶部不宜过高（）以确保紫外线有效灭菌效果；墙壁光滑无死角方便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH观察。
无菌操作间空气消毒：
紫外线灯—－产生臭氧，而且室内温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。
空气过滤恒温恒湿装置—－最好。
表1 洁净室（区）空气洁净度等级表
洁净度等级 尘粒最大许可数／立方米 微生物最大许可数 浮游菌／立方米 沉降菌／皿
100级 3,500 0 5 1
10000级 350,000 2,000 100 3
100000级 3,500,000 20,000 500 10
300000级 10,350,000 60,000 - 15
无臭氧紫外线消毒器
电子消毒灭菌器—－在高压电场作用下，电子管内外电极发生强烈电子轰击，使空气电离而将空气中氧转换成臭氧。臭氧是一个强氧化剂，能同细菌胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应，从而靠臭氧气体弥漫性扩散达成杀菌之目标，消毒时没有死角。消毒后空间残留臭氧只需30～40min即能自行还原成氧气，空气不留异味，消毒物体表面不留残毒。
（2）净化工作台：操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。通常细菌培养室使用净化工作台关键有两种：a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称水平层流式。
净化工作台工作原理（大致相同）—－通常是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经高效空气过滤器精滤，由此送出洁净气流以一定均匀断面风速经过无菌区，从而形成无尘无菌高洁净度工作环境。
侧流式工作台—－空气净化后气流由左或右侧经过工作台面流向对侧，也有从上向下或从下向上流向对侧，形成气流屏障保持工作区无菌。工作台结构为封闭式。
外流式（水平式）工作台—－净化后空气面向操作者流动，因另外方气流不致混入操作，但进行有害物质试验操作则对操作者不利。工作台结构为开放式（已少用）。
净化工作台应用注意：
（1）净化工作台应安装在隔离好无菌间或清洁无尘房间内，以免尘土过多易使过滤器阻塞，降低净化效果，缩短其使用寿命。
（2）新安装或长久未使用工作台，工作前必需对工作台和周围环境用真空吸尘器或不产生纤维工具进行清洁工作，然后再采取药品灭菌法或紫外线灭菌进行灭菌处理。
（3）使用净化工作台前，应先用75％酒精擦洗台面，并提前以紫外线灭菌灯照射30～50min处理净化工作区内积存微生物。关闭灭菌灯后应开启风机使之运转两分钟后再进行培养操作。
（4）净化工作区内不应存放无须要物品，以保持洁净气流流型不受干扰。
（5）注意净化区内气流改变，一旦感到气流变弱，如酒精灯火焰不动，加大电机电压仍未见情况改变则说明滤器已被阻塞，应立即更换。通常情况下，高效过滤器三年更换一次。更换高过滤器应请专业人员操作，以保持密封良好。粗过滤器中过滤布（无纺布）应定时清洗更换，时间应依据工作环境洁净程度而定，通常间隔3-6个月进行一次。
（6）净化工作台使用完成应立即清理工作台面上物品并用酒精擦洗台面使之一直保持洁净。
（7）净化工作台应定时进行功效测试，检验净化工作台各项工作指标是否达成要求，比如进行无菌试验，定时检验台面空气洁净度是否达标。
超净工作台无菌程度检验超净工作台在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检验空气中菌落数；取直径约90mm平皿，在超净工作台内点燃酒精灯，在酒精灯旁，以无菌操作，将平皿半开注入溶化营养琼脂培养基约20ml，制成平板，在30～35℃预培养48小时，证实无菌后将平板3个，以无菌方法带入超净工作台内左、中、右各放一个；打开平皿盖扣置，平板在空气中暴露30分钟后将平皿盖盖好，置30～35℃培养48小时，取出检验，100级清洁度要求：3个平皿上生长菌落数平均不得超出1个。
超净工作台应定时请相关部门检验其洁净度，应达成100级（通常见尘埃粒子