文档介绍：摘要关键词:松萎蔫病;荧光假单胞菌荒局仕毓趸锩福还化物酶;基因克隆松材线虫病琍饕Mü珊痔炫NK拗鞔úィ怯伤珊天牛携带的松材线虫鸬囊恢炙墒骰倜鹦源炯病。『梢远远嘀炙墒舻闹参镌斐晌:ΑS捎谒刹南叱娌〉姆⑸头⒄构讨猩及到松树寄主、媒介昆虫、松材线虫、相关的微生物以及环境条件等多种因素,而这些因素之间构成了复杂的关系,所以给该病的致病机理研究以及防治工作造成了难度。本实验研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌呐嘌壕蛩犸Х旨沉淀后各组分中木质素过氧化物酶幕钚约案髯榉侄院谒尚∠赴亩拘浴1文还对一菌株胞外辛顺醪酱炕⒍源炕蟮拿秆灾式辛搜芯俊结果表明:钚灾饕3鱿衷ヒコ恋碜榉种校怀コ恋碜榉郑%沉淀组分对黑松悬浮细胞的毒性也很强。昱嘌壕蛩犸Х旨冻恋硪及—两步纯化后,℃,最适为。,酶活保持相对稳定。:.蚄对酶活的抑制作用分别达到%和%,而6悦富的抑制作用只有%左右。吸收光谱显示该酶在处有一个澹尤雔:螅舛瘸鱿至嗣飨缘南陆担玈峰没有显著移动。另外,我们构建了荧光假单胞菌甑幕蜃槲目猓⑶彝ü锘性测定的方法从文库中筛选出一个产***的转化子。我们对核苷酸序列进行了测定,结果表明该序列含一个的开放读框。信号分析软件推测┒擞幸桓氨基酸的信号肽。同源性分析显示,***基因的核苷酸序列与輚的基因,的嘈凸趸锩讣易寤蛞约笆腡转移酶分别有%,%和%的相似性。我们分别克隆了编码全长蛋白的基因和去掉信号肽的基因,并在中进行了可溶性表达、探索了目的蛋白最适诱导表达条件。通过亲和层析的方法得到了纯化的全长以及去掉信号肽的重组蛋白。生测结果表明全长以及去掉信号肽的重组蛋白都对黑松的悬浮细胞显示了毒性。分析显示,加入全长重组蛋白和过氧化氢的黑松松枝提取物组分发生了明显的变化,这说明此种***蛋白可能是一种过氧化物酶。痬/
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.,荧光假单胞菌蜃槲目獾墓菇ḿ岸舅鼗虻纳秆『涂寺”泶牧嫌敕椒材料..饕J约方法..ü〉睦┐∠∠⋯***基因的分离集蛄蟹治觯***基因的克隆、表达与纯化⋯⋯.重组蛋白对黑松悬浮细胞及黑松切根苗的毒性测定重组蛋白对黑松切根苗萎蔫率测定参考文献⋯⋯⋯~综述参考文献一⋯⋯.力
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引言松材线虫病且运珊痔炫NK拗鳎⒂伤珊痔炫P乃刹南叱鸬囊恢炙墒骰倜鹦源静『Γ貌∽钤缬扇毡人鉴定和命名凇D壳拔V梗刹南叱娌≡谑澜绶段诘姆植记丫斜泵乐薜拿国、加拿大和墨西哥,亚洲的日本、韩国和中国,另外还有欧洲的葡萄牙等龉摇目前,在北美洲的这几个国家,松材线虫并未造成松树的严重危害。然而,在亚洲该病已经造成大量的松树死亡睁薄萌斯づ嘌乃刹南叱娼又晟暮谒伞⒊嗨苫褂衅渌嘀炙墒鳎结果发现黑松、赤松和琉球松最容易感病,同时实验结果还表明只有将线虫接种到木质部才会使松树致病。餐媒又值姆椒ㄖな盗怂刹南叱娴致病性。这样,线虫的病原性才逐步得到证实,明确松材线虫为松材线虫病的病原,并得到广泛的认同。等っ鰾是同一个种。虽然国内外学者历经数十年的研究,但是松材线虫病的致病机理仍未搞清楚。不过,松材线虫病是由松材线虫单一病原引起的松树病害的单一病原学说在森林病理学学术界一直占统治地位杨宝君引。在该病研究的早期,主要从病理生理学和组织生理学等方面研究松材线虫病的发病机理。病理生理学主要研究该病的发病症状,松树受侵染后,出现典型的枯萎症状,针叶变黄,松脂的分泌减少。主要是寄主松树的蒸腾作用和光合作用受到影响O忠衙魅罚髦置诘募跎俸屯V故亲钕瓤杉哪诓恐⒆础M保刹南虫的侵染还可以改变感病松树体内的矿物质元素和有机物的运输和分布乜争驯。现已确定,感病松树表现病理症状以前,其内部组织已经发生了一系列的病变。被感染的松树