文档介绍：液相色谱基础知识
2017年04月11日
一、什么是色谱
≯色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析
仪器。
啼色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技
术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就
成为色谱分析法。
→常见的分离方法
蒸馏、离心、电泳、过滤、超滤、等等
→色谱法的发明人
俄国科学家:
M. S. Tswett
二、什么是液相色谱呢
液相色谱
HPLc液石日E
相
柱色谱
薄层色谱
纸色谱
三、什么是高效液相色谱
High Performance Liquid Chromatography
高效液相色谱法,简称:HPLC
→是一种区别于经典液相色谱;基于仪器方
法的高效能分离手段
≯具有高性能的色谱柱,高精度、耐高压的
输液泵以及高灵敏度的检测器。
HPLc的分离原理、仪器配制和工作流程
分离原理匚
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动画演示
HPLC色谱柱
数据处理系统
进样器
溶剂
●●
色谱泵■
检测器[
废液
四、高效液相色谱法的特点
高一广一快”
≯①高压:对载液加高,流动相能迅速通过色谱柱压.
→②高效:分离效能高
→③高灵敏度:,进样量在
uL数量级。
④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可
用高效液相色谱分析
⑤分析速度快:较经典液体色谱法速度快得多,
通常分析一个样品在15-30分钟,有些样品甚至
5分钟内即可完成,一般小于1小时
五、高效液相色谱法的主要类型及原理
啼1、液液分配色谱Y
2、液-固吸附色谱￥
→3、离子交换色谱
→4、离子对色谱
5、离子色谱
6、排阻色谱
7、亲和色谱(AC)
1、液液分配色谱
→固定相与流动相均为液体(互不相溶)
基本原理:组分在固定相和流动相上的分配;
峥流动相:对于亲水性固定液,采用疏水性流动相
流动相的极性小
定液的极性(正相 normal
phase),反之,流动相的极性大于固定液的极
姓(反相 reverse phase)。正相与反相的出峰顺
序相反
固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采
啼化学键介園定相x将夆种不同甚团遭过化学区座
反相柱)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂
反相高效液相色谱法
→即指流动相的极性大于固定相极性的色谱
方法。
→在本法中常采用化学键合相作为固定相,
流动相采用水一甲醇或水—乙***系统,在
反相色谱中,极性强的组分在分离时先流
出柱子,极性弱的组分后流出。因此适合
于共存组分极性差异较大的样品分析。
乙*** Ging)
啼乙***又名******,分子式CHCN,无色透
明液体,密度小于水,约为079,能与水和
乙醇等有机溶剂以任意比混溶,易燃,有
毒性