白细胞抗原检测.ppt

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人类白细胞抗原(HLA)
HLA抗原分布相当广泛
·HLA-类抗原是引起血小
见于所有的有核细胞上,板同种免疫和血小板输注
但在淋巴细胞上的密度最无效的主要抗原,约占
80%
·血小板上的HLA抗原是血
小板膜表面的固有结构成
分,主要是HLA-类的A、
B位点的抗原
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HLA抗原检测技术
人类白细胞抗原检测技术已广泛应用于器官移
植前的组织配型
·检测方法:血清学方法、细胞学方法和基因分
型方法
与临床输血的关系一HLA抗原可引起免疫应答
→HLA抗体→发热性非溶血性输血反应和血小板
输注无效
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HLA血清学方法
血清学方法:是用一系列已知的抗HLA抗原的标
准血清来检测未知淋巴细胞表面的HLA抗原型别
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微量淋巴毒实验
·原理:淋巴细胞膜表面具有HA抗原,而分型血
清中含有抗特定HLA抗原的细胞毒抗体,该抗体
与淋巴细胞膜上的相应的HLA抗原结合后在补体
的参与下损伤细胞膜,经染料染色后,通过观
察细胞是否被染色来判断待测细胞是否损伤或
死亡,进而判断抗原、抗体反应的强度。
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抗血清的来源和标准
①通过妊娠、输血和同种器官移植等免疫作用
产生HLA同种抗体
·②使用纯化的HLA抗原免疫动物,可产生HLA异
种抗体
③使用杂交瘤技术,可获得单克隆抗体
④少数存在的天然抗体
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质量标准
1血清特异性程度(FP《3%,FN《14%)
2血清的强度,采用强度指数S表示,S|》70%
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纯合细胞分型方法
·该方法的原理为带有AA纯合抗原的细胞(HTC
)作为刺激细胞,带有未知抗原X/X的检测细胞
作为应答细胞,在两种细胞组成的单向混合淋
巴细胞培养反应(MLC)中,如果发生刺激反
应,表明受检细胞能够识别A抗原当成外来抗原
,所以受检细胞不具有A抗原,反之受检细胞可
能是A抗原的杂合子或纯合子
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预致敏淋巴细胞试验
在应答细胞A与刺激细胞B的初次混合淋巴细胞
培养反应(MLC中,经过9-12天培养,应答细胞
A增生为淋巴细胞后变成小淋巴细胞,即为预致
敏淋巴细胞(PL)