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2分钟学会UVP的凝胶电泳分析软件.docx

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上传人:sssmppp 2020/12/5 文件大小:681 KB

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文档介绍

文档介绍:2分钟学会UVP的凝胶电泳分析软件
在各个论坛上看以过许多凝胶电泳分析的软件,但没有UVP使用的
Labwork的介绍。
如果你购买了 UVP的凝胶电泳拍摄及分析系统,上面就会带一个la bwork分析软件。打开这个软件你就可以发现其界面非常熟悉,原来 这就是Media Cybernetics公司利用Imageproplus程序的内核专门 应用于分析凝胶电泳图片的软件。上而还有许多Imageproplus的功 能呢。
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分析电泳图片还是很简单的,两分钟就能学会,只耍在那个1 D-Gel 工具条从上往下一个一个点开来设置一下就OK。
打开一个图片后,先要把图片上的电泳条带摆得横平竖直,加样孔处 于图片上方。这一步只要点第一个菜单rotate,然后用鼠标转图片就 是。
第二步是指定泳道。, 用鼠标可以拖动泳道位置,还可以在泳道上下边拖来延长或缩短泳道
长度。
泳道宽度设置时,先勾上Uniform lanes width,然后在:ft上面的lane s width ±把数值加大或减小一些。让选择泳道宽度框全部覆盖住条 带。
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设置完了泳道,再设置条带。
占 bands 菜单,在 dark bands bright background 与 bright band
dard background之间选一个,(DNA凝胶是白带黑背景,蛋白质凝 胶是黑带口背景)min band height设一个稍大的值,(别太小,否则 自动找到一大堆条带还得一个个删。)
点一下find bando就自动找到一些明显的条带了,用add和delet e band按纽加上未找到的条带,删掉误识别的条带。这个操作也很 简单,点
add band按纽,出来一个新对话框,不理它,可以在电泳 照片上认为该有条带的地方点一下,就强迫加上了一个条带。还可以 在lane frofile窗口的曲线上准确找到峰顶位置点一下加上条带。加 完后点0K回到band窗口。
注意每个条带也有一个计算范围,可在曲线上拖它的上下边界。这个 边界的选择耍仔细。一方面尽量让各条带的范围一致,另一方面则是 选择条带光密度峰的山脚处作为边界。这两者很难同时满足。经常得 牺牲一方而。
设置完泳道与条带,下一条是设置背景。前面还有个加样孔位置耍设 置,因为我们已经把加样孔放到上方了,就不必设置它了。
背景的较正方法有许多选择,但只有一个实用。就是joining valleys. 上一帖图中峰下面有一根斜线,那就是背景扣除的界限。下面的面积 被扣除。只计算背景线上方的区域作为条带定量的依据。
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最麻烦的是设置marker参数。
点marker菜单,弹出设置窗口,上面是指定marker泳道位置的按 纽。系统默认第一泳道为markero但我们经常把marker放到另的泳 道上去。这块胶上有两个marker,分别在第一与第十三泳道上,设 定方法是:
点reset清除掉窗I丨,再点select/unsel...按纽。在第一与第十二泳道 上分别点一下,窗口中会出现lane 1和lane 13字样,说明这两个 泳道被指定为marker.
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下一步耍指定Marker中各条带的分子量。
•点new按纽,出来一个新的窗口,最上面要起个名字(test)。
•在下而的数字窗口屮输入第一个分子量数字(2000)。点一下旁边的 勾。
3•再点add按纽。
4 •可见第一个分子量数据已经显示到窗口里了。
5•重复2、3输入全部的分子量数值。
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