文档介绍：二、基本原理：
选择适合于待分离微生物的生长条件，造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物；加入某种指示剂，使待分离微生物在培养基中形成具有明显特征的菌落。
微生物在固体培养基上生长形成单个菌落，挑取菌落平板划线获得纯培养。
通过吲哚试验和糖发酵试验以及小型发酵实验证明该菌种为乳酸菌，杆状的叫做短乳杆菌，链球状的叫做乳链球菌。
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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三、实验器材：
菌种来源：
市场销售的各种新鲜酸乳
培养基：
BGC 牛乳培养基
乳酸菌培养基
蛋白胨水培养基
糖发酵培养基
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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BGC 牛乳培养基
（A）溶液：脱脂乳粉 100g，水500mL，%溴甲酚绿()乙醇溶液1mL,80℃灭菌20min。
（B）溶液：酵母膏10g，水500mL，琼脂20g，, 121℃灭菌20min。
以无菌操作趁热将（A）、（B）溶液混合均匀后倒平板。
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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乳酸菌培养基
牛肉膏5g，酵母膏5g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，乳糖5g，***化钠5g，水1000mL，pH：； %溴甲酚绿
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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蛋白胨水培养基
蛋白胨10g，***化钠5g，水1000mL，pH：~
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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糖发酵培养基
蛋白胨水培养基1000mL，%溴甲酚紫乙醇溶液1~2mL，pH：，另配20%糖溶液（葡萄糖，蔗糖）各10mL。
制法：
1）将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（pH：）分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管。
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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2）将已分装好的蛋白胨水培养基和20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水培养基121℃灭菌20min，糖溶液112℃灭菌30min。
3)灭菌后，每管以无菌操作分别加入20%，则成1%的浓度。
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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有关溶液：
%溴甲酚紫乙醇溶液：，贮存于棕色瓶中保存备用。
吲哚试剂：对二***氨基苯甲醛8g，95%乙醇760mL，浓盐酸160mL。
10%硫酸
2%高锰酸钾
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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含氨的***盐溶液：
称取***银2g，蒸馏水100mL，待***银溶解后，取出10mL备用，向其余的90mL***银中滴加氨水，即可形成很厚的沉淀，继续滴加氨水至沉淀刚刚溶解成为澄清溶液为止，再将备用的***银慢慢滴入，则溶液出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状的沉淀又消失，继续滴入***银，直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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四、操作步骤：
（一）乳酸菌的分离纯化
培养基的配制 灭菌 倒平板
制备样品稀释液 接种（涂布法）
培养
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微生物学实验技术乳酸菌的分离和纯化
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