文档介绍：实验三微生物接种技术
一、实验H的
1、 掌握无菌操作在微牛物接种过程屮的重要性。
2、 掌握儿种常用的微牛物接种方法。
3、 掌握微牛物微牛物扩大繁殖的基本方法。
4、 认识微生物接种工具 二、实验原理
微牛物接种技术是牛物科学研究屮最基本的操作技术。由于实验H的、培养基种类及容 器等不同，所用接种方法不同，如斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等，以获得牛 长良好的纯种微牛物。为此，接种必须在一个无杂菌污染的环境屮进行严格的无菌操作；同 时，因接种方法的不同，常采用不同的接种工具，如接种针、接种环、移液管和玻璃刮铲等。
三、 实验器材
主要仪器及设备 无菌室、超净工作台、培养箱、振荡器、接种针、接种环、接种钩、 接种铲，试管固体斜面培养基、培养基平板、三角瓶液体培养基，PDA平板及斜面，牛肉膏 ■蛋白月东■琼脂平板、斜而培养基、牛肉膏■蛋白月东液体培养基、试管半固体培养基。
菌种 大肠杆菌（EscheHchia coli）、青霉（Pemcillium sp.）＞ 酿酒酵母｛Saccharomyces cerevisiae Hansen）＞ 细黄链霉菌｛Streptomyces microflavus）放线菌等。
四、 操作步骤
（一）斜面接种技术具体操作如下：
1、 贴标签 接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种口期、接种人姓名等。贴在距试 管口径2-3厘米的位置。
2、 点燃酒精灯。
3、 接种 用接种环将菌种移接到贴好标签的试管斜面丄。无菌操作程序简述如下：
⑴手持试管 将菌种和用于接种的斜面两支试管用大拇指和其他四指握在左手屮、使屮 指位于两试管之间。斜而向上，并使它们位于水平位置（图a）。
⑵旋松棉塞 先用右手将棉塞旋松，以便接种时易于拔岀。
⑶取接种环右手拿接种环在火焰将环端烧红灭菌，然后将有可能仲入试管的其余部分, 均用火烧过灭菌。
⑷拔棉塞 用右手的无名指、小指和手掌边先后拔出试管的棉塞，然后让试管口缓缓过 火灭菌（切勿烧得过烫），如图b、C所示。
⑸环冷却 将灼烧过的接种环伸入菌种管，先使环接触没有长菌的培养基部分，使其冷 却。
⑹取菌种 待环冷却后轻轻沾取少量菌或泡子，然后将接种环移出接种管，如图d所示, 注意不要使环的部分碰到管壁，取出后不可使环通过火焰。
⑺接种在火焰旁迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管C从斜面培养基的 底部向上部作“之”字形来冋划线，方向是从下部开始，一•直划至上部，勿划破培养基（图
以便观察菌种的牛长特
⑻塞棉塞
取出接种环，灼烧试管口，并在火焰旁将棉塞塞上。
塞棉塞吋，不要用试管
迎棉塞，以免试管在 气，如图f、g所示。
⑼环灭菌将接 接种环，再将棉花塞
移动时带入不洁空 种环烧红灭菌。放下
旋紧，如图所示。
e） o有吋也可用接种针仅在斜面培养基的屮央划一条线作斜面接种,
斜面接种吋的无菌操作
（-）穿刺接种
（1） 取两支新鲜半固体牛肉膏蛋白豚柱状培养基，做好标记（写上菌名）、接种日期， 接种人等）。
（2） 接种的方法是，用接种针沾取少量待接菌种，然后从柱状培养基的屮心穿入其底部 （但不要穿透），然后沿原刺入路线抽出接种针，注意接种针不要移动。