文档介绍：第二军医大学
硕士学位论文
嗅鞘细胞体外诱导神经干细胞定向分化的研究
姓名:穆丽芳
申请学位级别:硕士
专业:神经生物学
指导教师:何成
20080401
三、缩略词表神经干细胞中枢神经系统细胞外基质大脑皮层混合细胞神经胶质瘤细胞株碱性成纤维生长因子左旋多聚赖氨酸条件培养液海马齿状回亚粒区少突胶质细胞前体细胞硫酸软骨素蛋白多糖第二军医大学硕士学位论文嗅鞘细胞固定细胞共培养胶质原纤维酸性蛋白侧脑室室下区表皮细胞生长因子··ぁ..
学位论文作者签名:柑手签字日期:辏阍氯缛签字日期:炒孑年∥月≯日独创性声明学位论文使用授权书声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽导师签名:学位论文作者签名:有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描授权书签字日期:加·暾钤轮H
一、中文摘要,侵妇哂蟹只I窬:蜕窬褐氏赴能力,能够自我更新,并提供大量神经细胞的原始细胞群。近年来,有关的研究已成为神经生物学领域的研究热点,因为它既是研究神经系统发育和神经细胞分化的良好载体,又是治疗中枢神经系统,损伤以及退行性疾病最理想的供体细胞来源之一。目前,原位诱导内源性增殖分化或移植已被尝试用于治疗帕金森症、亨廷顿病、癫痫、脑缺血和中枢创伤等多种中枢神经系统疾病。研究表明,内源性激活或外源性移植可以明显缓解疾病的临床症状,并在一定程度上促进受损功能的恢复。定向诱导分化为成熟的具有功能的神经元或胶质细胞是使其能应用于临床治疗的关键问题。研究发现,的分化与其所处微环境密切相关。微环境主要由各种可溶性因子、膜结合因子和细胞外基质戎诙喔丛拥某煞炙钩桑些成分相互影响,相互协调,通过细胞间相互作用的方式参与的分化发育和功能调节。因此,深入的研究微环境对分化的调节作用,对临床治疗神经系统疾近年来,嗅鞘细胞有前景的治疗方法之一。动物实验发现,移植可以促进大鼠皮质脊髓束再生,并促进肢体运动功能恢复。临床实验也显示,人种植于脊髓损伤患者的脊髓中,可以部分改善脊髓功能。研究发现,移植的可以通过多种机制促进神经再生。移植的通过分泌多种细胞黏附分子和神经营养因子,使脱髓鞘的轴突重新生成髓鞘,为轴突的再生提供一个良好的微环境;同时形成一个化学和物理屏障来防止再生轴突与胶质瘢痕中的抑制因子接触,进而促进脊髓损伤修复。然而,移植对中枢内源性增殖和分化是否具有影响目前还知之甚少。本实验旨在研究对分化的影响及其可能的作用机制,为研究在鹕诵薷粗械纳镅Щ铺峁┬碌南咚鳎币参狽浦灿糜谏窬低退行性疾病及鹕说牧俅仓瘟铺峁┮恍┬碌乃悸贰在研究中,我们首先从成年新生∈蹦;蛐∈蟠竽云ぶ是掷培养,鉴定,然后采用细胞共培养模型,比较,大脑皮层混合细胞神经胶质瘤细胞株对分化的影响,通过观察细胞形态,统计分析不同条件下分化为粜韵赴虶粜韵赴的比例,从而对诱导分化的影响进行初步的探索。结果发现:嗅鞘细胞体外诱导神经干细胞定向分化的研究神经干细胞病具有重要意义。琌移植被认为是脊髓损伤最珺
层的迅速分裂增殖,形成悬浮生长的细胞球。神经球免疫荧光染色显示,神经球中几乎所有细胞都表达的特异性标志。在撤离神经营养因子,并添加的条件下,生长在—狶坏腸上的可以分化为阳性的神经元、阳性的星形胶质细胞以及粜缘南培养基诱导分化旌螅鄄旆⑾⑾衷谖扪G迮嘌鵑盏挤只天后,培养基诱导分化旌螅鄄旆⑾諳橹校珿旧粜韵赴壤显高于对照组,具有显著统计学差异。,实验,在无血清培养基诱导分化旌螅鄄发现在共培养组中,染色阳性细胞比例明显高于对照组,具有显著统计嘌律鶪转基因小鼠神经干细胞球在体外增殖迅速,染色阳性,在无血清培养基诱导旌螅浞只I窬#切谓褐氏赴琋阳性细胞,符合基本生物学特征,在本实验中成功建立了;蛐∈蟠竽云层体外原代培养的技术。种芅騈阳性细胞分化,此作用由细胞表面分子和分泌的可溶性分子参与介导。俳鳱蛐切谓褐氏赴较蚍只ザ赖腛赴砻娣肿踊騉分泌的可溶性分子无此作用,说明对向星形胶质细胞方向分化的影响可能需要细胞表面分子或分泌的可溶性分子的协同作用。关键词:神经干细胞,嗅鞘细胞,只第二军医大学硕士学位论文诤猩窬Q蜃觔纳づ嘌褐校醋孕律鶪转基因小鼠大脑皮胞。谙赴才嘌P椭校玁隣以及共培养,在无血清显低于三个对照组,具有显著的统计学差异。,凸潭ㄏ赴才嘌组和固定的