基因治疗.pptx

文档介绍：基因治疗
麻醉4班第4组
基因治疗的基本原理
1、治疗性基因的选择
2、基因载体的选择 病毒载体
　　　 非病毒载体
4、靶细胞的选择 体细胞
　 生殖细胞
3、载体与治疗基因重组及筛选鉴定
将重组DNA导入靶细胞,检测目的基因和标记基因的表达产物
基因治疗的基本原理
5、基因转移 　间接体内疗法
　直接体内疗法
6、转导细胞的筛选与鉴定
7、回输体内
利用标记基因和目的基因的表达产物利用核酸分子杂交
8、考核疗效和安全性
基因治疗的应用
一 、遗传病的基因治疗
二、 肿瘤的基因治疗
三、感染性疾病的基因治疗
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遗传病的基因治疗
二）腺苷脱氨酶（ADA）缺陷遗传病的基因治疗
DA缺陷↓ →腺嘌呤核苷酸代谢受阻→dATP↑→T淋巴细胞DNA链不断崩解，同时激活DNA依赖的ADP-核糖聚合酶的活性,降低NAD水平，使蛋白质合成减少细胞死亡，同时也影响B细胞功能。
1）单个核细胞的分离：使用淋巴细胞分层液分离患儿血中单个核细胞；
2）单个核细胞培养：以“OKT3抗体+IL2”刺激体外培养T细胞增殖，分化；
3）逆转录病毒载体介导外源基因转染T细胞；
4）将转染细胞回输给患儿体内。
ps：由于对疾病基因的了解不足与基因导入具有一定困难，所以实际操作较困难
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肿瘤的基因治疗
1）恢复抑癌基因功能
转染正常抑癌基因于肿瘤细胞，使之表达正常抑癌基因产物，在一定程度上抑制肿瘤的恶性表型，如转染P53和RB。
2）抑制癌基因的表达
①使用抑癌基因关闭癌基因表达或使其表达产物失活；
②使用反义核酸抑制癌基因的转录
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