文档介绍：河南农业大学
硕士学位论文
紫茎泽兰F3'H基因表达载体的构建及对烟草转化的研究
姓名:张松焕
申请学位级别:硕士
专业:植物学
指导教师:李春奇;程红梅
20090601
摘要乃曰基因和对照植物表达载体转化到烟草体内。表明外源基因乃日在转基因烟草中均能正常转录并表达,且表达量各不相同。.紫茎泽兰丹何基因表达载体的构建及对烟草转化的研究的主要化感成分——泽兰酮诱导,推测其可能与化感作用相关。通过研究紫茎泽兰化感作用相关的冒基因并分析其功能,并且进一步探索紫茎泽兰化感作用的分子机理,研究乃以实验室保存的含有全长乃曰基因的质粒为模板,设计带有回收的丹胃基因片段和去磷酸化的载体用结果发现,转乃胃基因烟草韵花色偏浅,转空载体靥的烟草花色较转乃胃交错的表型。表明乃何基因与次生代谢途径中花色素的形成密切相关。半定量结果对转基因和野生型烟草进行生理检测结果表明,转乃冒基因烟草比转空载体烟草和野生紫茎泽兰是一种世界性的恶性杂草,现已在我国南方和西南地区广泛分布。并且其蔓延速度极快,引起了社会各界的广泛关注:紫茎泽兰具有很强的化感作用,能分泌化感物质抑制周围植物的生长。在分泌化感物质的代谢途径中,,从而为紫茎泽兰的控制和管理提供理论依据,减少紫茎泽兰所造成的经济损失和减轻其对生态系统的破坏。本研究构建了虻墓勘泶镌靥澹渥H胙滩萏迥冢⒎直鸾辛松碇副甑检测和分子生物学检测。拗菩悦盖形坏愕囊物,进行┰龇从Α扩增产物电泳分析后将目的条带回收,与甌载体连接,命名为’甌。。同时用玴参锉泶镌靥逑咝曰厥盏奶醮チ姿峄怼=幼牛用噶樱硬镒;大肠杆菌感受态细胞校羧⊙粜钥寺〗屑ā=幼爬门└司榈嫉囊杜谭ò基因烟草深,但比野生型烟草花色浅,其中有部分转/基因的烟草的花出现条纹状的深浅检测结果显示,与野生型植株相比较,转基因植株体内虻谋泶锪烤胁煌潭鹊南调,推测可能是由于虻牡既耄浔泶锸艿窖滩菽谠椿虮泶锏挠跋欤佣寡滩莼青素成分发生改变,导致烟草的花色变淡。型烟草的过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶活性都高。本文还设计了含有坏阈蛄和坏阈蛄的引物,利用际跬ü鼴蚅刈榉从Τ晒菇薘干扰载体,并将其转化入烟草体内。关键词:紫茎泽兰’靥骞菇ㄑ滩葑;
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碱蝼名孕枞聊签名渤青学院领导躲研究生签名:仅市矽恹磁奇导师签名:膨形吣日期:撕,年日日期:孤,年￡翯日日期沙月咎日河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书独创性声明日期:年‘月学位论文使用授权及知识产权归属承诺紫茎泽兰乃曰基因表达载体的构建及对烟草本人呈交论文是在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果,除了文中果,也不包括为获得河南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意。媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人完全了解《河南农业大学知识产权保护办法》的有关规定,在毕业离学位论学位硕士文题目转化的研究级别学生学科导师李春奇姓名张松焕植物学专业程红梅如需保密,解密时间年月日特别加以标注和致谢的地方外,文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成料,指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献本人完全了解河南农业大学关于保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷本和电子版本,并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意河南农业大学可以用不同方式在不同开河南农业大学后,就在校期间从事的科研工作发表的所有论文,第一署名单位为河南农业大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河南农业大学所有,否则,承担相应的法律责任。注:保密学位论文在解密后适用于本授权书。日期:学位论文是否保密
致谢在论文即将完成之际,首先向我的导师李春奇副教授表示感谢罾鲜γ羧的科学思维、严谨的治学态度、孜孜不倦的求知精神和高度的敬业精神令我受益终身。李老师在生活和工作中也给予了我很多关心,并提出了很多宝贵的建议,衷心感谢我的导师,祝您身体健康,工作顺利同时,中国农业科学院生物技术研究所的程红梅研究员也悉心指导了本文的完成,程老师在学业上和生活上给予了我无微不至的关心,程老师渊博的学识、敏锐的洞察力、勤奋严谨的工作态度,都将使我终生受益。在此,向程老师表示在试验过程中得到了中国农业科学院重大工程楼笛槭