文档介绍:实验室常用溶液的配制
1.30%丙烯酰***溶液
【配制方法】将29g丙烯酰***和1g N,N’-亚甲双丙烯酰***溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器()过滤除菌,,置棕色瓶中保存于室温。
【注意】丙烯酰***具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰***和亚甲双丙烯酰***时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰***无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰***和双丙烯酰***通常含有一些金属离子,在丙烯酰***(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰***和双丙烯酰***会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。
2.40%丙烯酰***
【配制方法】把380g丙烯酰***(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰***溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰***溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。
【注意】见上述配制30%丙烯酰***的说明,40%丙烯酰***溶液用于DNA序列测定。
3.放线菌素D溶液
【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。
【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。
药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。
4.(ATP)溶液
【配制方法】 ATP, ,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃
5.10mol/L乙酸酰溶液
【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。
6.10%过硫酸铵溶液
【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。
7.BCIP溶液
【配制方法】-溴-4-***-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二***甲酰***中,保存于4℃
8.2×BES缓冲盐溶液
【配制方法】[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、 Na2HPO4,室温下用HCl调节 、然后加入蒸馏水定容至100ml,,分装成小份,保存于-20℃。
9.1mol/L CaCl2溶液
【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O,,分装成10ml小份贮存于-20℃。
【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器()过滤除菌,然后骤冷至0℃。
10. CaCl2溶液
【配制方法】 CaCl2?6H2O,,分装成1ml小份贮存于-20℃。
11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液
【配制方法】用20ml () DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。
12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液
【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右, Tris碱分别调节 (用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。
13. EDTA()溶液
【配制方法】***四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在