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实验常用溶液的配制方法.doc

上传人:AIOPIO 2020/12/16 文件大小:126 KB

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文档介绍

文档介绍:常见实验用溶液的配制方法
1mol/L亚精***(Spermidine): ***于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精***(Spermine):***于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸***(ammonium acetate):***溶解于水中,加水定容至1L后,。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,。
8mol/L乙酸钾(potassium acetate):,加水定容到100ml。
1mol/L***化钾(KCl):***化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodium acetate):,,再加水定容到100ml。
EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(),混合后形成EDTA的三钠盐。·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:,用NaOH调pH(-),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:。
25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2: MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯***磺酰***)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH )。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)
5mol/L***化钠(NaCl):***化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N氢氧化钠(NaOH):(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二烷基硫酸钠):,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
100%三***乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)
% X-gal(5-溴-4-***-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二***甲酰***(DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。
100×Denhardt试剂(Denhardt's regent)
成分及终浓度
配制100ml溶液各成分的用量
2%聚蔗糖(Ficoll,400型)
2%聚乙烯吡咯烷***(PVP-40)
2%BSA(组分V)

2g
2g
2g
加水至总体积为100ml
依照上表称取各组分,溶于水中定容。过滤除菌及杂质,分装成小份于-20℃贮存。
10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接)
成分及终浓度
配制10ml溶液各成分的用量
Tris-HCl
100mmol/L MgCl2
100mmol/L DTT
2mmol/L ATP
5mmol/L 盐酸亚精***(