日本血吸虫新基因SjPP的筛选克隆及对小鼠的免疫效果.pdf

文档介绍：中国农业科学 2006,39(8):1659-1666
Scientia Agricultura Sinica
日本血吸虫新基因 SjPP 的筛选、克隆及对小鼠的免疫效果
姚利晓,林矫矫,傅志强,朱传刚,李浩,陆珂,刘金明,石耀军,沈阳,蔡幼民
(中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室/上海动物生物技术研究中心,上海 200232)

摘要:【目的】筛选克隆东方田鼠血清识别的日本血吸虫靶抗原基因,并研究其免疫保护效果。【方法】利用
东方田鼠感染血清免疫筛选日本血吸虫(中国大陆株)成虫 cDNA 表达文库获得阳性克隆,以 5′ RACE 技术扩增获
基因全长序列,构建含目的基因的核酸疫苗并研究在小鼠中的免疫保护效果。【结果】(1)获得 4 个日本血吸虫新
的 EST 序列,即 mfs-1(GenBank 登录号 BE974942)、mfs-3(GenBank 登录号 BE974944)、mfs-4(GenBank 登录号
BE974945)和 mfs-5(GenBank 登录号 BE974946)。(2)mfs-5 进行全长序列克隆,获得的日本血吸虫新基因
SjPP(GenBank 登录号 AY902477)长 1311 bp, 编码 302 个氨基酸,理论分子量为 kD,等电点为 ;其氨
基酸序列具有丝/苏氨酸蛋白磷酸酶(serine/threonine specific protein phosphatase,简称 PP)的保守序列
LRGNHE,并且含有该酶特异性抑制剂冈田酸的作用位点 SAPNYC,与人的 PP6、鼠 PP6、果蝇 PPⅤ等蛋白的氨基酸
序列具有高度同源性,分别达 72%、70%和 70%。(3)成功构建核酸疫苗 pCMV-Script/SjPP,免疫 BALB/c 小鼠诱
导产生肝组织减卵率为 %,粪便减卵率为 %。【结论】(1)获得日本血吸虫新的抗原基因 SjPP。(2)含
SjPP 基因的核酸疫苗在小鼠中诱导了部分免疫保护效果。
关键词:日本血吸虫;东方田鼠;丝/苏氨酸蛋白磷酸酶;核酸疫苗;免疫保护

Screening, Cloning and Immunological Efficiency of SjPP, a Novel
Schistosoma japonicum Gene
YAO Li-xiao, LIN Jiao-jiao, FU Zhi-qiang, ZHU Chuan-gang, LI Hao, LU Ke, LIU Jin-ming,
SHI Yao-jun, SHEN Yang, CAI You-min
(Shanghai Institute of Animal Parasitology, Chinese Academy of Agricultural Sciences; Key Laboratory of Animal Parasitology,
Ministry of Agriculture, Shanghai Research Center for Animal Biotechnique, Shanghai 200232