文档介绍：青岛大学
硕士学位论文
siRNA对宫颈癌SiHa细胞中VEGF-165表达及细胞增殖影响的研究
姓名:孙芳
申请学位级别:硕士
专业:妇产科学
指导教师:赵淑萍
20080517
要摘关键词:恍》肿痈扇牛还敝琢觯籗赴荒谄は赴因子目的:探讨小分子干扰对宫颈癌细胞系细胞中一谋泶及细胞增殖的影响,对扇偶际踉谥琢鲋瘟屏煊蛑杏τ玫目赡苄越谐醪教讨,为下一步利用扇偶际跻种浦琢鲅9苄纬梢约熬植壳窒驮洞ψR铺峁研究基础。方法:体外化学合成针对一膕,用无静默效应荧光标记谧染试剂的介导下转染细胞,荧光显微镜下监测其转染效率,筛选出和转染试剂的最适宜转染用量。实验分为椋栉醋H鞠赴?瞻锥哉组,特异性H镜氖笛樽榧拔薰匦蛄衧转染的阴性对照组。利用ḿ觳釹赴H竞笙赴鲋郴钚裕ü馐凳倍縍ǚ直鸺测转染、、和骃赴蠽的表达情况,检测细胞培养液中一鞍追置诹康谋浠结果:虷淖罴阎柿刻寤任H維赴螅魇奔涞阌攵哉兆橄啾萔泶水平明显下降值分别为.、.、,差异有统计学意义值分别为.、.,;细胞生长较对照组明显受到抑制值分别为.、.、.,。而阴性对照组与空白对照组比较,:梢杂行б种乒卑㏒赴鸙捌涞鞍椎谋泶锼剑抑制细胞增殖。实验结果表明特异性苡行Ы榈脊卑┫赴鱿諶以作为靶点的肿瘤基因治疗及扇偶际踉谥琢鲋瘟屏煊蛑杏τ锰峁依据。
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论文作者签名:廖嘭指导教师签字:套议彩日期:Ⅲ留年岁月%日日期:沁留年奶“日学位论文知识产权权属声明日期:辏旅婺学位论文独创性声明《本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品,知识产权归属学校。学校享有以任何方式发表、复制、公开阅览、借阅以及申请专利等权利。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位仍然为不保密函。本人声明,所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成果。文中依法引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上’已属于他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。本人如违反上述声明,愿意承担由此引发的一切责任和后果。青岛大学。本学位论文属于:保密口,在年解密后适用于本声明。朐谝陨戏娇蚰诖颉啊论文作者签名:学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明
引言宫颈癌是女性生殖道最常见的恶性肿瘤,近年来国内外文献报道宫颈癌的发生率呈上升趋势,是危害妇女健康与生命的主要疾病。目前宫颈癌的发病原因及机制尚未完全阐明,除手术治疗外,其他治疗方法进展缓慢。近年来的研究表明,肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤血管的生成,血管形成在恶性肿瘤的发生、发展及转归过程中起着重要作用。以新生血管为靶点对肿瘤进行生物治疗已成为近几年新的研究热点。血管内皮生长因子,易迨且蛔榈节内皮细胞生长的因子,是迄今鉴定出来的最重要的血管生成因子,具有促进血管内皮细胞分化、增生、迁移和浸润的作用,能直接或间接参与血管生成,无论是在生理病理还是在胚胎与成体,都具有重要的调节作用【,与肿瘤的生长、浸润和转移有密切关系,并与肿瘤生物行为相关函。现已发现家族包括、、疤ヅ躺ひ蜃取’D壳把芯拷隙嗟奈猇,即通常所指的。基因经转录水平的剪切,可产生直湟焯澹莅被岬某ざ命名为:一、、。等⑾止卑┲兄饕1泶蚔,并且两者在较晚期富颈腺癌中表达水平明显升高,提示作为可溶性亚型,在宫颈癌的发生、发展中起着关键作用。因此,以及其受体为靶点的基因治疗是最重要的抗宫颈癌新生血管生成策略之一,有望成为抗宫颈癌生长、转移以及治疗的新方法。目前采用的方法主要包括:抗及其受体的单克隆抗体,野彼峒っ男》肿右种萍良巴源性反义龋渲杏行┮丫肓俅彩匝榻锥巍5ǔ捎谜攵訴耐庠性反义椒ㄍ猓渌椒ň荒芴匾煨缘匾种芕庠葱苑匆錜也由于干扰效率低而应用受限。扇,切陆⑾值囊恢种匾5淖B己蠡虺聊象,,该序列发生特异性的降解,能特异性导致基因表达的沉默,近年发展迅速,是一种比反义寡核苷、核酶等技术更加高效、特异、快速的基因治疗技术,在人类基因功能研究、信号转导研究及基因治疗方面已显示出巨大的前景【壳耙殉晌;蚬δ苎芯康那看蠊ぞ撸⒃诩膊∪绨滩籽2『肿瘤的基因治疗中取得了巨大进展。如】等以各亚型为靶序列,利用技术成功抑制了特异各亚型在卵巢癌细胞的表达。证明了盏的有高度的序列特异性且表达抑制现象可持续转染后天左右。青岛大学硕士学位论文
近年来利用扇偶际跽攵訴捌涫芴宓难芯空艿焦愦笱д叩闹厥樱【τ肰吹鞍字使菇ǹ尚纬蓅质粒载体,发现其对肿瘤细胞的抑制作用明显。实时荧光定量現甈技术是近两年发展起来的一项新技术【小#核诨懔薖技术的核酸高效扩增,探针技术的高特