文档介绍：摘要：
分光光度法是利用物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同这一特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
关键词：光源 可见光 波长范围 比色皿 Lambert-Bear 定律
主要内容：
工作原理
光是一种电磁波,具有一定的波长和频率。可见光的波长范围在400~760nm，紫外光为200~400nm，红外光为760~500000nm。可见光因波长不同呈现不同颜色，这些波长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。太阳或钨丝等发出的白光是复合光，是各种单色光的混合光。利用棱镜可将白光分成按波长顺序排列的各种单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就是光谱。有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同颜色，而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
在比色分析中，有色物质溶液颜色的深度决定于入射光的强度、有色物质溶液的浓度及液层的厚度。当一束单色光照射溶液时，入射光强度愈强，溶液浓度愈大，液层厚度愈厚，溶液对光的吸收愈多，它们之间的关系，符合物质对光吸收的定量定律，即Lambert-Bear 定律。这就是分光光度法用于物质定量分析的理论依据。
二，721分光光度计的使用
721分光光度计使用前准备工作
，接通电源开关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位，预热20min后，再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档，用调“0”电位器调整电表为T=0％
盖上样品室盖使光电管受光，推动试样架拉手，使参比溶液池（溶液装入4／5高度，置第一格）置于光路上，调节100％透射比调节器，使电表指针指T＝100％。
重复进行打开样品室盖，调0，盖上样品室盖，调透射比为100％的操作至仪器稳定。
样品的检测
盖上样品室盖，推动试样架拉手，使样品溶液池置于光路上，读出吸光度值。读数后应立即打开样品室盖。
平行测定三次，取算数平均值。
测量完毕后仪器整理
.测量完毕，取出比色皿，洗净后倒置于滤纸上晾干。各旋钮置于原来位置，电源开关置于“关”，拔下电源插头。
备注：放大器各档的灵敏度为：“l” ×1倍；“2”×10倍；“3”×20倍，灵敏度依次增大。由于单色光波长不同时，光能量不同，需选不同的灵敏度档。选择原则是在能使参比溶液调到T＝ 100％处时，尽量使用灵敏度较低的档，以提高仪器的稳定性。改变灵敏度档后，应重新调
“0”和“100”。
三，721分光光度计常见故障排除
100%点经常变动
比色皿在比色皿槽中放置的位置不一致或其表面存水滴；解决办法：用擦镜纸擦干净比色皿表面然后将其放在比色槽左边，用定位夹定位
电路故障；解决方法：整修电路
%
光能量不足；解决方法：增