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血细胞分析仪简介.doc

上传人:陈潇睡不醒 2020/12/28 文件大小:48 KB

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文档介绍

文档介绍:血细胞分析仪简介
作者:陈宏础
                                 陈 宏 础
    20世纪50年代,库尔特(W. H. Coulter)先生根据血细胞不良导体的特性,以电解质溶液中悬浮细胞颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化(即电阻抗原理,又称库尔特原理),产生脉冲再经仪器放大、甄别、整形、计数,生产出第一台血细胞计数仪,开创了血细胞分析仪的新纪元,使人工计数实现自动化。随着科学技术的发展,血细胞分析仪也日新月异,目前己普及至县或卫生院,现将常用血细胞分析仪的基本测定原理、校准及质量管理介绍如下。
一、血细胞分析仪原理简介
(一)红细胞和血小板参数检测原理
    由于库尔特原理不但能进行血细胞计数,而且可以同时测定每个细胞体积。血液经较高倍数的稀释后,正常情况下白细胞所占比例较少,可以忽略不计,通过血细胞分析仪计数和细胞体积大小处理,即可获得RBC、PLT数量和MCV、MPV及RBC和PLT体积分布直方图。如仪器中再引入血红蛋白测定系统。通过RBC、Hb、MCV的实测数据,自动计算出HCT、MCH、MCHC、RDW等参数。
有的仪器采用流式细胞术加二维激光散射法检测RBC及PLT。全血经专用稀释液稀释后,使自然状态下的双凹盘状扁圆形红细胞成为球形并经戊二醛固定,这种处理并不影响红细胞的平均体积。红细胞通过测量区时,激光束以低角度前向光散射测量单个红细胞的体积和红细胞总数,同时用高角度光散射测量每个红细胞内血红蛋白浓度。同样原理可测定每个血小板的大小、数量和密度,使红细胞及血小板计数更加准确。
(二)网织红细胞参数检测原理
    有的仪器除了进行全血细胞计数外,还利用流式细胞术进行网织红细胞计数。先将荧光染料(或新亚甲蓝)与网织红细胞内RNA结合,通过相应激光束时,仪器同时测量前向散光强度和荧光强度,分别反映细胞体积大小和胞浆内RNA多少,构成二维显示散点图。将网织红细胞分成低荧光强度(low fluorescent reticulocyte,LFR)、中荧光强度(middle fluorescent reticulocyte,MFR)和高荧光强度(high fluorescent reticulocyte,HFR)网织红细胞。幼稚网织红细胞荧光最强。反之,成熟红细胞极少或没有荧光。仪器还可提供网织红细胞绝对数及网织红细胞成熟指数(reticulocyte mature index,RMI)。RMI增高与骨髓移植、慢性溶血、近期出血或疗效反应有关;RMI降低通常提示骨髓衰竭或无效造血。
(三)白细胞参数检测原理
    白细胞计数是利用溶血剂将一定倍数稀释的血液中红细胞溶解,而白细胞胞浆也经胞膜渗出,胞膜紧裹在细胞核和存在的颗粒周围,使白细胞成为“膜包核”状态被保留下来。利用电阻抗原理经小孔计数出白细胞数量及体积测定,通过白细胞体积分布直方图,将白细胞大小进行分群,即当今的二分群、三分群血细胞分析仪。
另一种类型血细胞分析仪是利用流式细胞术和光散射原理。首先将血液进行稀释,在鞘流液的作用下,形成细胞流,细胞排列成单列通过光学检测区,引起光散射变化,获得脉冲信号。信号大小与细胞体积有关,以此来进行白细胞计数及体积大小测定。
(四)白细胞五分类检测原