文档介绍：中华检验医学杂志2004年5月第27卷第5期 ChinJLabMed,May2004,Vol27, ·295· 临床实验诊断研究连接酶链反应一酶联免疫吸附试验诊断沙眼衣原体感染的初步应用韦红吴仕孝余加林伍金林刘官信【摘要】目的建立连接酶链反应一酶联免疫吸附试验(LCR—ELISA)检测沙眼衣原体DNA的方法,并初步应用于检测新生儿沙眼衣原体感染。方法针对沙眼衣原体外膜蛋白基因设计4条引物, 并分别在其两端标记***和生物素。用此4条引物进行LCR扩增沙眼衣原体DNA。带有生物素和***双标记的扩增产物以ELISA方法显色判断结果。采集328份肺炎新生儿鼻咽标本,分别对其进行培养和LCR扩增,应用ELISA检测有无沙眼衣原体感染。结果 LCR—ELISA方法可以检测出 6种沙眼衣原体标准株,而对2种肺炎衣原体和其他细菌DNA无反应,显示出较强的特异性;可检测出10的DNA,较传统电泳法敏感10倍,且避免了溴化乙啶的污染。328份标本中,LCR—ELISA检测出68份阳性,培养仅检测出60份,两者相比差异有显著性。以扩大的金标准判断,LCR—ELISA的特异性、敏感性分别为100%%;而培养的特异性、敏感性分别为100%和、%。结论 LCR—ELISA是一种特异而敏感的基因扩增方法,避免了溴化乙啶污染,判断结果客观,检测方便。经临床初步应用,取得良好结果,值得进一步研究和完善。【关键词】聚合酶链反应;衣原体,沙眼;酶联免疫吸附测定;新生儿病证 EstablishmentandappncafionofLCR—ELISAforthedetectionofchlamydiatrachomatisinfectionin neonatalpneumonia —xiao,YUJia—l WUJ一l,HUGuan— Newborn,Children~Hospital,ChongqingUniversityofMedwalScience,Chongqing400014,China 【Abstract】ObjectiveToestablishaLCR—ELISAtodetectChlamydiatrachomatisinfectionin neonateswithpneumonia、 Methods Twopairsofprobesofchlamydialoutermembraneproteingene (omp1)werelabeledwithbiotinanddigoxin,. —digoxi—