文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
山麦冬的细胞生物学与组织培养研究
姓名:周健丘
申请学位级别:硕士
专业:生药学
指导教师:陈家春
20090501
华中科技大学硕士学位论文
中文摘要
山麦冬Liriope spicata (Thunb.) ,是中药麦冬主流品种湖北麦冬
Liriope spicata (Thunb.) Lour. var. prolifera 。湖北麦冬为湖北省道
地药材,应用广泛,与山麦冬关系密切,但相关基础研究较少。本课题为了配合湖北
麦冬不育机理的研究,以山麦冬为研究对象,对其遗传学、细胞学及组织培养进行了
研究探讨,为其种质资源研究奠定了基础。研究方法及结果如下:
1. 采用压片法和去壁低渗法对山麦冬染色体进行了核型研究。结果表明压片法用
于山麦冬核型分析时,中期分裂相清晰,染色体缺失少。山麦冬为四倍体植物,其核
型公式为2 n=4 x=72=48 m+24 sm,遗传进化上属2B型。
2. 采用压片法和去壁低渗法观察山麦冬小孢子母细胞减数分裂行为及小孢子发
育过程,并对山麦冬的花粉活力及畸形率进行研究。结果表明山麦冬小孢子母细胞减
数分裂过程基本正常,染色体能正常配对和分离。存在低比率(<%)的畸形现象,如
落后染色体、染色体桥等。山麦冬小孢子发育基本正常,成熟花粉为三细胞型。开花
期间花粉一直有较高活力,在花开 1~4 h活力达到最大。统计了 1 106 个山麦冬成熟
花粉,其中畸形花粉 38 个,畸形率为 %。
3. 采用石蜡切片法,对山麦冬的花药发育过程进行观察。结果发现山麦冬花药绒
毡层为分泌绒毡层,二分体时期开始解体,至花药完全成熟时,绒毡层和中层细胞彻
底消失。绒毡层在花药发育中起了重要作用。
4. 以改良的 MS 培养基为基本培养基,采用 KT mg/L+2,4-D 进行花
药愈伤组织诱导培养时,诱导率最高,为 %,生芽培养基采用 MS+6-BA ~
mg/L +NAA ~ mg/L,生根培养基采用 1/2MS+NAA ~ mg/L。采用压片法对
再生植株进行核型分析,发现与自然种植植株核型相同,讨论了核型相同可能的原因。

关键词: 山麦冬;核型分析;减数分裂;小孢子发育;石蜡切片法;花药发育;
花药组织培养
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华中科技大学硕士学位论文
Abstract
Liriope spicata (Thunb.) Lour. is the original variety of Liriope spicata (Thunb.) Lour.
var. prolifera , which is known as the main materia medica of traditional Chinese
medicine, Maidong. L. spicata var. prolifera is a authentic materia medica in Hubei
province. With the aim to cope with research of sterility of L. spicata var. prolifera, the
present study was carried on L. spicata in ics, cytology and tissue culture, hoping to
acquire some novel findings between the two plants. The results are shown as follows:
1. Karyotype of L. spicata was examined using the squash method and wall
degradation hypotonic treatment (WDH) method. The results indicated that squash method
was a better way for L. spicata’s karyotype analysis and it is tetraploid. The karyotype
formula, which belongs to symmetrical 2B