文档介绍：学****要求
观察肠道杆菌的形态染色
观察肠道杆菌在SS培养基上的生长情况及菌落特征。
掌握鉴别肠道杆菌的主要生化反应
熟悉肥达反应的操作方法，掌握判定肥达反应结果的方法。
实验内容
1、肠道杆菌形态观察（革兰染色、油镜观察）—（每人做）
大肠杆菌 伤寒杆菌 痢疾杆菌 变形杆菌
2、 肠道杆菌的培养—SS平板、双糖铁培养基（示教）
大肠杆菌 伤寒杆菌 痢疾杆菌 变形杆菌
3、 肠道杆菌的接种—SS平板、双糖铁培养基（每组做一份）
4、 肠道杆菌的生化反应— I M Vi C （示教）
5、肠道杆菌的血清学试验
肥达（Widal）反应（示教）
6、肠道杆菌的检查(录像)33
痢疾杆菌
伤寒杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌（非致病菌）在SS培养基上可形成相对较大，不透明，红色的菌落。
致病性肠道杆菌在SS培养基上形成相对较小，半透明，无色或淡黄色的菌落。
SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长；还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。
该培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。指示剂为酚红。葡萄糖与乳糖的比例为1:10。
若细菌分葡萄糖、乳糖产酸产气，使斜面与底层均呈黄色，且有气泡。
若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低；而上层少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，呈红色。
若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。
配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。
I M Vi C :鉴别肠道杆菌的四种常用方法
例如 大肠杆菌的结果为：+ + - -
产气杆菌的结果为：- - + +
I 靛基质试验（吲哚试验）：某些细菌具有色氨酸酶，可以分解蛋白胨的色氨酸生成靛基质，也称吲哚，与对二***氨基苯甲醛作用生成红色的玫瑰吲哚（阳性）。
玫瑰吲哚
M ***红（MP）试验：细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生***酸，***酸进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸等，，加入***红呈红色为阳性。如细菌分解葡萄糖产酸量甚少，或产生的酸进一步转化为其他物质时，，***红呈橘黄色为阴性。