文档介绍：分类号学校代码量Q5垒2 密级学号 2QQ重量量2鱼鱼鱼3 醇酸盐缓冲体系在毛细管区带电泳中的氢键分离效用研究 Study ofhydrogen bonding effectofhydroxy acid buffer oncapillary zone electrophoresis 研究生姓名许庆平指导教师姓名、职称陈波教授学科专业分析化学研究方向(烟草)色谱分离分析湖南师范大学学位评定委员会办公室二零一三年十一月摘要选用醇酸(乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸)的盐溶液作为高效毛细管区带电泳的缓冲体系,针对可能与之形成氢键作用力的不同分离对象,如:烟草生物碱[降烟碱(Nomicotine)、烟碱(Nicotine)、麦斯明(Myosmine)、假木贼碱(Anabasine)]、DNA、氨基酸、氨基酸的同分异构体等,进行了分离研究。通过对醇酸盐缓冲体系、pH条件、醇酸(乳酸:pKal=,酒石酸:pKal=、pKa2=,苹果酸: pKal=、pKa2=,柠檬酸:pKal=、pKa2=、pKa3=) 盐缓冲液浓度、电泳运行电压、样品进样条件、电泳运行温度等进行考察,获得了最优条件;进而成功地应用到了不同的分析体系,学位论文主要成果和创新点有: (1)在集中关注缓冲体系与被分离物之间的氢键作用力存在的同时,发现了一种在烟草生物碱麦斯明阳离子与柠檬酸盐阴离子子之间的类似络合物螯合作用方式,其作用保持了麦斯明电泳分离过程中环亚胺结构的稳定性,成功解决了烟草中麦斯明的毛细管区带电泳分离检测问题。(2)以pH 、360mmol/L的酒石盐作缓冲溶液,利用阳离子选择性耗尽在柱富集技术,实现了烟草生物碱的毛细管区带电泳基线分离。与磷酸盐缓冲溶液进行比较,卷烟样品生物碱测定的数量多、检测限低。(3)从手性异构体分子结构上的差异,依靠同样具有同分异构体的醇酸盐缓冲体系,通过相互间氢键的立体选择性作用,实现了对氨基酸手性异构体的分离,为今后手性异构体的拆分提供了新思路。(4)设想醇酸盐与富含氢键作用源(碱基)的DNA片段作用, 将导致DNA片段在醇酸盐溶液中定向运动时,由于分子链越长,形成的氢键越多,所受阻力越大,迁移速率越小,进而可以据此将不同长度的DNA片段一一分开。通过实验研究,证实以醇酸(柠檬酸) 盐作缓冲体系的毛细管区带电泳可以成功地分离DNA Marker。(5)借鉴DNA在较高电场强度下的无交联高分子溶液筛分理论之瞬态缠结偶合(Transient entanglement coupling,TEC)及其改进机理,特别是DNA和缓冲溶液分子之间的氢键特殊相互作用,充分利用当DNA分子在缓冲溶液分子中进行迁移时,DNA片段与缓冲溶液分子相互缠结或碰撞,且较大的DNA分子具有更大的可能性与更多的缓冲溶液分子相遇并缠结,导致淌度下降更多,从而可以按照大小对 DNA进行分离的原理。创新地将柠檬酸盐既作缓冲溶液,又作筛分介质,应用于单链DNA的高效毛细管区带电泳分离;分析方法的精密度高,重现性好。关键词:醇酸盐缓冲体系,高效毛细管区带电泳,氨基酸,生物碱, DNA ABSTRACT Selecting hydroxy acid(1actic acid,Malic acid,tartaric acid,citric acid)salt as a buffer system ofhigh performance capillary zone electrophoresis,according to the possible different forces from the formation of allhydrogen bonds betweet objects such as nicotine nornicotine,myosmine,anabasine,DNA,amino acids,amino acid isomers and alcholic acid,aseriesseparation studies separation conditions such as buffer pH,alkyd concentration, electrophoresis run voltage, and sample injection lengh andelectrophoresis run temperature were optimal conditions were applied indifferentappications essfullgThe main resultsand innovation points are as