文档介绍：目录
试验一 芦丁提取精制和判定
试验二 精制芦丁含量测定
试验三 发酵法生产丝氨酸
试验四 青霉素抑菌圈观察
时间安排:
星期一下午: 配置丝氨酸产生菌培养基及接种、 金黄色葡萄球菌所需培养基及倒板
星期二早晨: 青霉素涂布（如周一下午时间充裕可改到周一下午）
星期三早晨: 丝氨酸产生菌离心, 兼做抑菌圈观察
星期三下午: 建立丝氨酸产生菌静息培养系统
星期四整天: 芦丁提取
星期五早晨: 绘制芦丁标准曲线, 及自己提取芦丁含量测定
星期五下午: 丝氨酸显色反应
试验一 芦丁提取精制和判定
芦丁（Rutin）亦称芸香苷（Rutinoside）, 在植物界广泛存在, 其中以槐米、 荞麦叶、 蒲公英和烟叶中含量较多, 可作为提取芦丁原料。
槐花米系豆科植物Sophora japonica 未开放花蕾, 含有调整毛细血管渗透性之作用, 临床用作毛细血管止血药, 如复方芦丁, 也作为高血压辅助诊疗药品。 除此之外, 还可作为制药原料, 用于制造槲皮素（Quercetin）、 羧乙基槲皮素、 羧乙基芦丁、 二羧丙基芦丁、 β-乙基吗啡芦丁、 6-而乙基氨基芦丁等。
槐花米中芦丁含量高达12%~16%,另含少许皂苷。 芦丁水解后得到槲皮素, 皂苷水解后可得到白桦酯醇（Betulin）及槐花二醇（Sophoradiol）。
芦丁为淡黄色细小针状结晶, 含三个结晶水, 熔点177~178℃。 ; 芦丁溶于热水（1:200）, 难容于冷水（1:8000）; 溶于热甲醇（1:7）, 冷甲醇（1:100）; 热乙醇（1:30）, 冷乙醇（1:300）, 难溶于乙酸乙酯、 丙酮, 不溶于苯、 三氯甲烷、 乙醚及石油醚等溶剂。 易溶于碱液中呈黄色, 酸化后又析出。
其结构以下图:
一、 试验目标
1、 经过芦丁提取和精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物原理及操作。
2、 经过芦丁结构检识, 了解苷类结构研究通常程序和方法
二、 试验原理
芦丁为浅黄色粉末或极细针状结晶, 含有三分子结晶水。 溶解度: 冷水1:10000; 热水1:200; 冷乙醇1:650; 热乙醇1:60; 冷吡啶1:12。 微溶于丙酮、 乙酸乙酯, 不溶于苯、 乙醚、 氯仿、 石油醚, 溶于碱而呈黄色。
芦丁为黄酮苷, 分子中含有酚羟基, 显酸性, 可溶于稀碱液中, 在酸液中沉淀析出, 可利用此性质进行提取分离。 利用芦丁易溶于热水、 热乙醇, 较难溶于冷水、 冷乙醇性质选择重结晶方法进行精制。
三、 试验器材
研钵, 500mL烧杯, 广泛试纸, 四层纱布, 滤纸, 漏斗, 10mL试管, 5mL移液管, 波棒, 洗耳球, 温控烘箱
石灰乳, 浓盐酸, 镁粉, 10%α-萘酚乙醇溶液, 浓硫酸, 乙醇, 2%二氯氧锆甲醇溶液, 2%柠檬酸甲醇溶液
四、 试验步骤
槐米粗粉（10g）
置250ml烧杯中, 加入一定饱和石灰水, 加热, 并维持pH8～9
煮沸20分钟, 趁热滤过
滤液 药渣
用一定量饱和石灰水煮沸10分钟, 维持pH8～9
趁热滤过
滤液 药渣（×）
合并
在60℃～70℃下用浓HCl调pH至4～5
静置, 抽滤
沉淀
低温（60℃）干燥, 称重。 按1: 200百分比加水,
加热使溶解, 趁热滤过
滤液
静置, 抽滤, 减压干燥, 计算收率
芦丁精制品
五、 试验内容
1、 芦丁提取精制
称取槐花米10g, 置于干燥研钵中用研钵挤压成粗粉。 -1g石灰粉。 置于洁净小研钵中, 加入5mL水后研成乳液备用。
将槐花米粗粉置于250mL烧杯, 加蒸馏水100-150mL, 煮沸, 在搅拌下加入石灰乳至pH8-9, 在此条件下微沸20-30min, 过滤。 在60-70℃下, 用浓盐酸调滤液至pH4-5, 搅匀, 静置1-2h, 过滤。 沉淀用蒸馏水洗2-3次至中性, 抽干, 60℃干燥得芦丁粗品。
称定芦丁粗品重量, 按1:200百分比悬浮和蒸馏水中, 煮沸10-15min, 趁热过滤, 冷却滤液, 充足静置结晶。 抽滤, 60-70℃干燥得精制芦丁。 称重, 计算得率。
2、