文档介绍：试验题目: 紫外分光光度法
测定醋酸地塞米松含量
教学目标:
1、 了解可见紫外分光光度计基础结构及操作步骤。
2、 学****可见紫外分光光度法测定物质含量原理和方法。
3、 掌握药品标示量计算方法。
教学关键:
学****可见紫外分光光度法测定物质含量原理和方法。
教学难点:
了解可见紫外分光光度计基础结构及操作步骤。
仪器药品:
UV-2550可见紫外分光光度计, 石英比色皿, 滤纸, 漏斗, 100ml容量瓶, 无水乙醇, 醋酸地塞米松片。
教学方法: 讲授、 演示
教课时数: 4课时
教学过程: （老师讲课思绪、 设问及讲解关键点）
一、 试验原理
分子和原子一样, 也有它特征能级。 分子内部运动能够分为价电子运动, 分子内原子在平衡位置周围振动和分子绕其重心转动。 所以子含有电子（价电子）能级、 振动能级和转动能级。
紫外吸收光谱是因为分子中价电子跃迁而产生。 所以, 这种吸收光谱决定于分子中价电子分布和结合情况。 按分子轨道理论, 在有机化合物分子中有多个不一样性质价电子: 形成单键电子称为σ键电子; 形成双键电子称为π键电子; 而象氧、 氮、 硫、 卤素等含有未成键孤对电子称为n 电子。 当分子吸收一定能量以后, 其价电子将从能量较低轨道跃迁到能量较高反键轨道。 分子内多种电子能量高低次序为
σ* 〉π* 〉n 〉π 〉σ
图所表示:
在大多数有机化合物分子中, 价电子总是处于n轨道以下各个轨道中, 当受到光照射时, 处于较低轨道能级电子将跃迁至较高能级。 由图可见, 可能跃迁有σ→σ*, σ→π*, π→σ*, n → σ*, π→π*, n →π*等六种, 其中σ→σ*、 σ→π*和π→σ*跃迁需要能量大, 所以产生这三种跃迁所吸光波长小于200nm,在远紫外光区, 对它们紫外-可见吸收光谱研究得较少, 同时它们在紫外-可见光区无吸收带, 所以在紫外-可见吸收光谱分析中常见作溶剂。 如戊烷、 己烷、 环己烷等。
下面分别讨论n→σ*, π→π*和n→π*跃迁。
1、 n →σ* 跃迁
n →σ*跃迁需要能量比σ→σ*小, 对应吸收波长在200nm周围。 当饱和碳氢化合物中H被含有n电子N, O, S和X（F,Cl,Br,I）等杂原子替换时, 将发生n →σ*跃迁, 所以在较长波优点比对应饱和碳氢化合物多一个吸收带。 在有些有机化合物中, 由替换反应而引入含有未共享电子正确杂原子基团, 如-NH2, -NR2, -OH, -OR, -SH, -F,- Cl, - Br,-I等后, 使吸收峰波长向长波方向移动, 这种效应称为红移效应。 这种能使吸收波长红移, 并使吸收强度增加杂原子基团称为助色团。 通常n →σ*跃迁摩尔吸收系数较小。 如水、 醇和醚等在紫外可见光谱分析中能够作为溶剂。
2、 π→π*和n →π*跃迁
有机化合物中由π→π*和n→π*产生吸收带最有用, 它们吸收峰在近紫外区或可见光区。 由吸收带波长能够估计未知有机化合物一些官能团或由有机化合物结构推算最大吸收波长λmax。
含有π电子基团, 如双键或三键, 会发生π→π*跃迁。 含有未共享n电子正确N, O, S 及卤素等基团会发生n →π*跃迁。 发生这两种跃迁分