文档介绍：广州医学院
硕士学位论文
改良的玻璃化冻融方案对人类卵母细胞冻融效果的研究
姓名:黄玉玲
申请学位级别:硕士
专业:妇产科学
指导教师:孙筱放;龙晓林
20090301
改良的玻璃化冻融方案对人类卵母细胞冻融效果的研究第一部分胎牛血清在不同操作温度下对各成熟阶段人类卵母细胞冻融效果的影响摘要学位申请人:黄玉玲教授龙晓林副主任医师研究方向:生殖与遗传的温度为℃,而放置在玻璃化液%弊T谑椅±的操作温度均为室温;椋郝涯赶赴胖迷诶涠臣敖舛骋旱牟僮魑露染℃;未冷冻组为对照组组诼涯赶赴捎猛琈期卵母细胞一样的冻融程序分别对应为、、和组。期卵母细胞也采用同对照组卵子及解冻后的存活卵子先进行体外成熟,,蟮腗卵母细胞、冻融后存活的涯赶赴岸改良的玻璃化冻融方案对人类卵母细胞冻融效果的研究导师:孙筱放目的探索含%胎牛血清現牟AЩ呕涸诓煌的操作温度下对各成熟阶段人类卵母细胞的冻融效果。方法收集我中心行体外受精胚胎移植仃琁—颊咧惺芫О艿某墒炻涯赶赴,和行卵胞浆内单精子注射琁患者中丢弃的未成熟卵母细胞、涯赶赴貌AЩ桨付融,玻璃化液为ヒ叶,%二甲亚砜珼./崽6橙诠讨性谌植同的温度下操作分为椤组、椤组:卵母细胞冷冻时放置在预平衡液℃胖迷诮舛骋旱牟僮魑露任妫籅组:卵母细胞放置在冷冻及解冻液母细胞一样冻融程序分别对应为、、和组。未成熟卵母细胞的广州医学院硕士学位论文
照组的涯赶赴潭ê蠼忻庖哂ü馊旧ǎ缓笥肗聚焦显微镜观察纺锤体、染色体形态。实验、槁涯赶赴橙诤蟮拇婊盥史直鹞%、.%、.比较均无显著性差异,%,卵母细胞的纺锤体和染色体正常率各实验组间相互比较及各实验组与对笛樽镸⒌亍腗诼涯赶赴橙诤蟮拇婊盥史直鹞%、ァ%,%、.ィ魇笛樽榧涞腗率相互比较:与、,,%与对照组纺锤体的缺失率%,纺锤体和染色体各型形态实验组间相互比较榈腎型染色体与楸冉洗嬖谙灾圆钜,其余组各型间的相互比较均无显著性差异。笛樽镚涯赶赴橙诤蟮拇婊盥史直鹞%、.%、ァ%,各实验组间的氏嗷ケ冉霞案魇笛组与对照组%的氏啾龋尴灾圆钜。实验组中只有组获得了龇拇柑搴腿旧逍翁B涯赶赴溆喔魇笛樽获得的成熟卵母细胞的纺锤体和染色体形态未有正常者,蠡竦肕照组相比均无显著性差异。笪椿竦肕卵子,、
第二部分两种玻璃化冻融方案对人类成熟期卵母细胞的冻融效果比较摘要实验组与对照组均未得到纺锤体和染色体形态正常卵母细胞。收集体外受精胚胎移植中受精失败的涯赶赴直鹩昧街植煌玻璃化方案冻融,其中方案翰AЩ;な约廖%蔗置在玻璃化液%弊T谑椅±,放置在解冻液的操作温度为℃;方案翰AЩ;な约廖%。期卵母细胞在添加母牧际约林欣涠呈狈胖迷谠て胶庖旱奈露任℃,而放置在玻璃化液%弊T谑椅拢舛巢僮魑度为℃的操作条件对纺锤体和染色体的损伤较小。放置在高浓度的玻璃化液时,应选择在室温,使细胞脱水更平缓,能够减少细胞脱水过程因体积剧烈变化带来的损伤。诼涯赶赴胖迷诶涠臣敖舛骋旱牟僮魑露染J椅碌亩橙谛Ч虾茫体外成熟获得的涯赶赴姆拇柑搴腿旧逭B首罡摺诼涯赶赴胖迷诶涠臣敖舛骋旱牟僮魑露染亩橙谛Ч虾茫解冻后存活卵母细胞体外成熟培养至奔渥疃蹋墒炻首罡摺关键词:玻璃化冷冻;胎牛血清;人类:卵母细胞;体外成熟;纺锤体;染色体论文类型:应用基础目的比较两种玻璃化冻融方案对人类成熟期涯赶赴拇柑濉⑷旧体的损伤程度。方法糖僮魈跫郝涯赶赴涠呈狈胖迷谠て胶庖旱奈露任,而放广州医学院硕士学位论文改良的玻璃化冻融方案对人类卵母细胞冻融效果的研究
糖僮魈跫階法一致;对照组为未冷冻卵母细胞。解冻后的存活卵母细胞及对照组卵母细胞固定后进行免疫荧光染色,然后用す馍韫聚焦显微镜,鄄旆拇柑濉⑷%,、染色体正常率与对照组相比无显著性差异ァケ%、.、染色体正常率与对照组比较有显著性差异%、ケ%、..