文档介绍：重庆医科大学
硕士学位论文
结肠癌肝转移相关蛋白的比较蛋白质组学研究
姓名:李俊材
申请学位级别:硕士
专业:外科学(普通外科学)
指导教师:傅仲学
20080501
摘要结肠癌肝转移相关蛋白的比较蛋白质组学研究官。几十年来,关于结肠癌肝转移的临床诊治及基础研究做了大量工作,但其总体预后并未得到显著改善,难以早期诊断而失去手术时机易获取并易于监测,故一直是筛选疾病诊断标志物的最佳研究对象。目前蛋白质组学已成为后基因时代生命科学研究新条件下全部蛋白质的表达、功能及其相互作用方式。其特点是以系统细胞转移是恶性肿瘤的重要特征。肝脏是大肠癌转移最常见的器是重要原因之一。血液组分变化可充分反映机体生理、病理过程,容目前常用的结肠癌肝转移血清标志物尚不能完全满足临床需求,因此,从血清中筛选新的结肠癌肝转移标志物受到医学研究人员和临床医生的高度关注。的热点,其定义为:研究一个细胞、组织或完整机体在某个特定时空生物学的研究思路,采用高分辨率的蛋白分离手段和高通量的蛋白鉴定技术,全景式地研究各种特定情况下的蛋白表达谱。不断发展、完善的蛋白质组学研究策略与技术正成为现代生物医学研究新的强有力工具。从血液中寻找特异性生物标志物用于结肠癌肝转移等诊断是目前临床急需解决的难题,本研究使用差异蛋白质组技术包括双向凝胶电泳—、基质重庆医科大学硕士研究生学位论文
觯⒘宋榷ǖ难G灏椎鞍缀虸如去除方法。第一部分结肠癌和结肠癌肝转移患者血清样品的处理琍萍龅辅助激光解吸离子化飞行时间质谱產,技术对结肠癌肝转移患者和结肠癌患者血清蛋白进行分析,获得了一些可能与结肠癌肝转移相关的标志蛋白质,推测其差异蛋白质的功能,并从蛋白质整体水平上探讨这些差异候选蛋白质是否与结肠癌可能的发生或转移机制相关,并为开展临床早期诊断、寻找治疗靶点等方面提供有价值的理论依据。目的:纯化血清蛋白质,减少高丰度蛋白对电泳的干扰。方法:参照人类蛋白质组研究组织难G宓鞍字首榧苹方法采集血液标本,利用萍鍪褂玫亩嘀值鞍字是缀颓宄低,比コR褐械亩嘀指丰度蛋白质,并通过蛋白电泳图谱比较前后的血清蛋白分离情况。结果:使用了蛋白清楚系统去除血清高丰度蛋白后,血清蛋白点数由鲈黾拥结论:多种蛋白质亲和清楚系统能有效去除血清中的高丰度蛋白,减少了高丰度蛋白对其的干扰。关键词:血清;蛋白质组学;/—,重庆医科大学硕士研究生学位论文
第二部分结肠癌肝转移患者血清双向电泳图谱的建立及优化第三部分结肠癌肝转移相关蛋白质的鉴定关键词:血清;蛋白质组学;双向凝胶电泳;目的:建立并优化血清蛋白质组双向电泳分离技术。方法:对籇母髦痔跫械髡⒂呕ü虻缬就计妆较各种方法对血清蛋白的分离效果。结果:采用胶条,含尿素、硫脲的上样缓冲液,.的甈禾岣吡搜G宓鞍椎姆掷胄Ч结论:血液中高丰度蛋白质的去除能提高了瓺计椎陌叩闶分辨率。成功建立了血清蛋白质的纯化技术,为寻找疾病的血清学标志物的研究奠定基础。目的:分析结肠癌和结肠癌肝转移血清的蛋白质表达差异。获取两者蛋白表达差异。方法:使用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱对结肠癌和结肠癌肝转移患者血清的双向电泳图谱中的差异蛋白质点进行鉴定。结果:成功鉴定出、等蛋白在结肠癌肝转移组血清中表达上调,个蛋白在重庆医科大学硕士研究生学位论文’
对照组血清中表达上调的蛋白质。结论:结果表明在结肠癌肝转移患者和结肠癌患者中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学这一高通量的筛查技术可望从中发现与结肠癌肝转移相关的标志物。关键词:结肠癌;肝转移;血清;蛋白质组学重庆医科大学硕士研究生学位论文
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