文档介绍:目的
掌握使用分光光度计.
掌握标准曲线法进行定量分析
掌握分光光度法测定药物或水中铁含量的操作方法及原理.
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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原理
铁是药物和水中常见的一种杂质,含量大时易产生特殊气味,因此对药物和饮水中的铁要进行检查和测定.
选择显色剂的基本原则
亚铁离子与邻二氮菲生成稳定的橙红色配合物.
Fe2+ +
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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应用此反应可测定铁,当铁以Fe3+离子形式存在于溶液中时,可预先用还原剂(盐酸羟胺或对苯二酚等)将其还原为Fe2+离子.
及显色条件的选择
显色时,溶液PH值应为2~(PH<2)显色缓慢而色浅;若酸度过低,,ε= 11100.
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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仪器与试剂
(1)722型分光光度计
(2)容量瓶(10ml,7个);
(3)吸量管(2,1ml)
(4)洗耳球
(5)擦镜纸
(6)标准铁溶液(20μg/ml)
(7)%水溶液
(8)盐酸羟胺1%水溶液(用时配制)
(9) HCA-NaAc缓冲溶液
(10) FeCl3待测液
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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以标准溶液的浓度为横坐标,相应的吸光度为纵坐标,绘制成A-C曲线即为标准曲线。
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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具体步骤:
在6只10ml容量瓶中,,,, ,, 铁标准溶液(硫酸铁铵每ml含Fe3+20μg),分别加入 ,, HAc-NaAc缓冲溶液,用水稀释至刻度后摇匀,,,在所选波长(508nm)下,,吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线.
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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以FeCl3为样品,(或适量),
并测定吸光度 ,根据测得的吸光度求出FeCl3样中总铁量.
据FeCl3样测得吸光度查出铁含量.
(1)在相同条件下测定样品溶液的吸光度,即可从标准曲线
查出样品溶液中被除测组分的浓度,
(2)将一系列标准溶液的浓度与相应的吸光度,进行线性回归,
然后将样品溶液的吸光度引入回归方程,计算样品溶液
中被测组分的浓度。
由于线性回归法制备的标准曲线,比手绘法更客观,
所以目前文献报到多采用此法。
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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标准曲线制备实例
,, ,,,,,以此为对照溶液,在268nm下测其吸收度,测定结果见表Table2
实验二 FeCl3中微量铁的测定
2021/1/14
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Table 2 Linear Relationship of Standard Material
NO. contents of standard A
material(mg/l)
1
2
3
4
5
6
实验二 FeCl3中微量铁的测定
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对对照品的吸收度和浓度进行线性回归,得回归方程:
A=+
γ = (A:吸收度,C:浓度)
~。
以对