文档介绍：选修 3《现代生物科技专题》知识点总结
专题 1 基因工程
一、基因工程的基本工具
“分子手术刀”——
（ 1）来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。
（ 2）功能：能够识别 DNA 分子的某种 的核苷酸序列，并且使每一条链中
部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。
（ 3）结果：经限制酶切割产生的 DN***段末端通常有两种形式：
和 。
“分子缝合针”——
两种 DNA连接酶（ E· coliDNA 连接酶和 T4- DNA连接酶）的比较：
①相同点：都缝合键。
②区别： E· coliDNA 连接酶来源于 ，只能将双链 DN***段互补的
之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA连接酶能缝合 ，但连接平
末端的之间的效率较 。
(2) 与 DNA聚合酶作用的异同： DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端，
形成磷酸二酯键。 DNA连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶 DNA聚合酶
连接的 DNA 链 链
不同点 模板 模板 模板
连接的对象 2 个 DN***段 单个脱氧核苷酸加到已存在的单链 DN***段上
作用实质 形成
相同点
化学本质 蛋白质
3. “分子运输车”——
（ 1）运载体具备的条件：
① 。
② 。
③具有 ，供 。
（2）最常用的运载体是 ，它是一种裸露的、结构简单的、独立于
，并具有 的双链 。
二、基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的获取
1. 目的基主要是指： ，也可以是一些具有 的因子。
原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有
法和 法。
技术扩增目的基因
1） PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DN***段的核酸合成技术。
2）目的：获取大量的目的基因
3）原理：
（4）过程：第一步：加热至
90～ 95℃， DNA解链为
；
第二步：冷却到
55～ 60℃，
与两条单链 DNA结合；
第三步：加热至
70～ 75℃，
从引物起始进行
的合成。
第二步：基因表达载体的构建
1. 目的：使目的基因在受体细胞中 ，并且可以 ，
使目的基因能够 。
2. 组成： ＋ ＋ ＋ ＋
（1）启动子：是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，是
识别和结合的部位， 能驱动基因 ，最终获得所需的 。
（2）终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的 。
（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中 ，从而将
筛选出来。常用的标记基因是 。
第三步：将目的基因导入受体细胞 _
1. ：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2. 常用的转化方法：
将目的基因导入植物细胞： 采用最多的方法是 ，其次还有 和
等。
将目的基因导入动物细胞： 最常用的方法是 。方法的受体细胞多是 。
将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是
，最常用的原核细胞是 ，其转化方法是：先用 处理
细胞，使其成为 ，再将 溶于缓冲液中与感受
态细胞混合，
在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA分子，完成转化过程。
重组细胞导入受体细胞后，筛选含基因表达载体受体细胞的依据
是 。
第四步：目的基因的检测和表达
1.
首先要检测转基因生物
DNA上是否
，方法是采用
技术。
2.
其次还要检测目的基因是否
，方法是采用
技术。
3.
最后检测目的基因是否
，方法是采用
技术。
4.
有时还需进行
的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。
专题 2 细胞工程
一、植物细胞工程
理论基础（原理）：
全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞 动物细胞
植物组织培养技术
（ 1）过程：离体的植物器官、组织或细胞 ―→愈伤组织 ―→试管苗 ―→植物体
（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。
（3）地位：是培育 、 培育植物新品种的最后一道工序。
植物体细胞杂交技术（ 1）过程：
（