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阿司匹林与人血清白蛋白的相互作用研究.doc

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文档介绍:阿司匹林与人血清白蛋白的相互作用研究.doc阿司匹林与人血清白蛋白的相互作用研究
阿司匹林与人血清白蛋白的相互作用研究
摘耍:目的:探讨阿司匹林与人血清白蛋白的相互作用。方 法:主要采用荧光光谱法,对二者之间的相互作用进行测定,同时 探讨二者之间的丄耍作用力。结果:阿司匹林与人血清白蛋白存在 猝灭效应,且具有静态性;同时范德华力为阿司匹林与人血清白蛋白 的主要作用力。结论:阿司匹林与人血清白蛋白主要通过范德华力结 合,因此阿司匹林一旦进入人体内部会有较快的代谢速度,此外,二 者结合后会改变蛋白质构象。 关键词:阿司匹林;人血清白蛋
白;相互作用 蛋白质属于生物大分子,生命现象以此为物质基
础。在血浆中血清白蛋白含量最为丰富,属于拥有重要地位的载体蛋 白[1]。当前临床药理学与药代动力学获得快速发展,也有诸多学者 开始对药物-蛋白质会如何影响药代动力学进行了研究。二者结合后, 留在血浆中的药物会对药物作用进行削弱,避免出现波动现象,同时 可增加药物作用时间。阿司匹林可用于诸多疾病的治疗中,具有优良 的止痛、消炎以及退热功效[2]。本文主要使用荧光光度法,对在特 定pH环境下阿司匹林与HSA (人血清白蛋白)会如何相互作用进行 研究,现分述如下。 1材料与方法 1.1 一般材料 主
要药品为阿司匹林对照品、人血清白蛋白以及色氨酸对照品,试剂则 主耍使用分析纯。选用荧光分光光度计(型号为CRT-9700,产自上 海第三光学)和酸度计(型号为Phs-3C,产自上海雷磁)以及超纯 水系统(型号为PWUV,产自力康生物)。 1.2 一般方法 1.2.1
溶液制备方法 在制备阿司匹林溶液时,首先称取0. 1125g的阿司匹 林,而后在其中添加硼砂缓冲溶液,pH值为9.18,且其中含有KCX, 剂量约为O.Olmol・1厂1,在溶解后将其放入量瓶中,容量为25ml即 可,而后定容,浓度为2.5X10-2mo 1・I厂1。制备人血清白蛋白溶液 时,选用0. 0691 g的人血清白蛋白,同样加入硼砂缓冲溶液,pH值 为9. 18,且其屮含有KCL,剂量约为O.Olmol・L-1,溶解后定容至

10ml的量瓶中。而后制备色氨酸溶液,称取0. 1062g的色氨酸定容 至量瓶中,容量为50ml o而后精密称取25P 1并将其转移至25ml容 器中,溶解后便会得到色氨酸溶液,浓度为1.041 mol・L-lo
1. 2. 2测定法 将浓度为4. 0X10-5mol - L-1、剂量为2ml的人血清 口蛋口溶液放至石英比色池中,容量为lcm,而后再在其中添加阿司 匹林溶液,剂量为16U 1,浓度2.5X10-2mo 1・L-1,在添加时主要 使用微量注射器,而后再开展荧光测定。每次混入溶液后均使其均匀, 而后分别放置于25°C与37°C的环境中,放置5min,直到平衡结合后 将激发波长设定为282mm,再使用荧光分光光度计对波长范围在 300nm至500nm之间的发射光谱了以准确记录。 2结果 2. 1
人血清口蛋口溶液发***位置蛋口质内源性荧光发***主要构成为 Tyr (酪氨酸)、Phe (苯i人j氨酸)以及Try (色氨酸)等残基,上述 残基各具特征荧光光谱。若测定条件为Eex二280mni,则人血清口蛋口 一口出现内源发光主要贡献为色氨酸。分别测

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