文档介绍：染色体标本制备及核型分析
染色体核型分析
质量保障部 Faye
染色体核型分析
一、名词解释
二、染色体标本制备
三、染色体核型分析
实验耗材
前期处理
实验步骤
玻片标本质量评价
计数标准、合格指标
染色体核型排列
核型检测的可重复性
染色体核型分析
一、名词解释
核型
分裂相
一个体细胞中的全部染色体，按其大小、形态特征顺序排列所构成的图像。
小鼠：♂ 40，XY 、♀ 40，XX
人类：♂ 46，XY 、♀ 46，XX
细胞分裂过程中每个时期的细胞形态特征，包括细胞的总体形状和遗传物质的变化。
染色体核型分析
一、名词解释
数量变异
（性染色体丢失/增加、近端着丝粒染色体三体）
（中期）分裂相核型
结构变异
（缺失、重复、倒位、易位）
染色体核型分析
二、染色体标本制备
实验耗材
仪器设备：
超净工作台、恒温培养箱、恒温水浴箱、离心机、光学显微镜、刻度离心管、乳头吸管、棕色试剂瓶、载玻片、吹风机、玻片架、染色缸
主要试剂：
秋水仙素、低渗液、卡诺氏固定液、吉姆萨染液、胰酶、1N HCl、1N NaOH、MEF培养基、PBS
染色体核型分析
二、染色体标本制备
前期处理
样品要求：对数期生长，状态良好，紧密度高，折光性好，细胞量≥T25 / 60 mm平皿
差速贴壁法去除MEF（ KSR培养体系除外）
终止培养前1~2小时，加入秋水仙素（100ug/ml），~。
作用：破坏纺锤体
防护：有剧毒、无挥发性
因素：时间、浓度
染色体核型分析
二、染色体标本制备
固定
细胞收获
制片
预固定
低渗处理
实验步骤
染色体核型分析
二、染色体标本制备
细胞收获
制片
固定
预固定
低渗处理
消化并收集细胞至离心管，吹打成单细胞悬液，250 g，5 min离心，弃上清
实验步骤
染色体核型分析
二、染色体标本制备
细胞收获
制片
固定
预固定
低渗处理
加入37℃预热的低渗液（ mol/L）5 ml，吹打至均匀，37℃水浴15-20 min。
实验步骤
染色体核型分析
二、染色体标本制备
细胞收获
制片
固定
预固定
低渗处理
加入37℃预热的低渗液（ mol/L）5 ml，吹打至均匀，37℃水浴15-20 min。
实验步骤
配制： mol/L KCl溶液
作用：低渗作用
因素：时间、温度、浓度
染色体核型分析