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高效液相色谱的基本参数讲义.ppt

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高效液相色谱的基本参数讲义.ppt

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高效液相色谱的基本参数讲义.ppt

文档介绍

文档介绍:色谱基本参数
§1 保留值
(1) 保留时间 tr
保留时间tr和死时间t0示意图
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(2) 保留体积

VR (ml) = tr(min) * Fc(ml/min)
VR= Vm +KVs
K--平衡分配系数, Vs--固定相体积, Vm =流动相所占体积
溶质在固定相中的浓度(ns/Vs) ns Vm
K=---------------------------------- = ---- * ----
溶质在流动相中的浓度(nm/Vm) nm Vs
ns, nm 溶质在固定相和流动相中的量
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(4) 容量因子 (k’)
固定相中容质的量(ns)
k´=------------------------
流动相中容质的量(nm)
K = k´(Vm/ Vs)
VR= Vm +KVs = Vm + k´(Vm/ Vs) Vs = Vm + k´Vm
= Vm (1+ k´)

tr = to (1+ k´) k´= t r / to - 1
k´与固定相,流动相性质及柱温有关;与流速,柱尺寸无关.
(3) 调整保留时间
tr´= tr - to V = VR - Vm
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(5) 死体积(Vm) 和死时间(to)
1) 采用比流动相溶剂少一个-CH2-基团的同系物(己烷—戊烷 )
2)甲醇/水------甲醇
3) 正相--------四***乙烯,反相---苯甲酸或***
4) 计算法
空柱管体积(Vc ) * 总孔隙度(εT)
流动相体积流速(F c)
t o =
= π/4 *d²c *L * εT/Fc
计算孔隙度
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§2 选择性指标(´)和相对保留值()
´= t r(2) / tr(1) =(1+ k´(2)/(1+ k´(1))
 = t r '(2) / tr' (1) = k´(2) / k´(1)
´作为选择性指标比 直观
与柱温固定相种类流动相组成有关
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§3 -1 流动相线速(u)
流动相线速u: 通常指平均线速度
u = L / t。
u =Fc /A *εT
A:柱截面积
L 和 u 一定时, t。一定
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§3 -2 柱总孔隙率(εT )
柱总孔隙率:柱横截面上流动相所占的分数,主要取决
于柱填料类型。
εT =Fc to / Vc
薄壳填料—
多孔硅胶—
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渗透性(Kf)
渗透性定义为 :Kf =uηLεT /Δp
式中:K0为渗透性常数(cm2),η为流动相粘度(Pa·s/cm2),△P为柱压降(Pa)
Fc为冲洗剂流速(ml/s) , L为柱长(cm),dc为柱内径(cm)
Vc--空柱体积
Kf = K0 εT =uηLεT /Δp
εT = /Vc
Kf = uηL Fc
Δ p Vc
Kf =dp² /1000
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K0为渗透性常数(厘米2)
η 为流动相黏度()
ΔP 为柱压降(大气压 X 106 或达因/厘米2)
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理论板高与线速的关系
H =A +B /u +Cu
A:涡流扩散项,B:纵向扩散项, C: 传质扩散项
Van Deemter