文档介绍：笫九章植物转化载体的构建
这一章主要有七节:
一植物基因工程载体的种类和特征
二根癌农杆TI质粒
三 T-DNA的结构特点和功能
四 T-DNA转移的机制
五植物基因转化载体系统
六发根家杆菌的RI质粒
七无选择标记基因植物转
笫一节植物基因工程载体的种类和特征
生物载体介导的遗传转化
非载体介导的遗传转化种质转化系统
直接转化系统
生物载体介导的遗传化根据截体的不同可以分为病毒载体和质粒载体介导的遗传转化.
植物转化基因的功能:
一
它能作为媒介将外源基因导入植物细胞中去,并且整合到宿主细胞的基因组DNA上.
二
它能提供被寄主细胞的复制和转录系统所识别的DNA序列,即启动子和复制子起始点位点,以保证转化的外源基因能在植物细胞中进行复制和表达.
一病毒载体
1 .单链的RNA植物病毒
2 .单链的DNA植物病毒
3 .双链的DNA植物病毒
以其优点如下;
植物病毒载体能把外源基因直接导入植物细胞,并且系统地分布到整个植株,无需经过从原生质体再生植株的过程,简化了植物基因工程中外源基因的传递过程.
病毒具有较高的自我复制能力,在转化植物中可以得到高拷贝的外源基因,有利于外源基因的表达和功能的实现,可以产生大量的外源蛋白质.
植物病毒载体感染植物后,病毒载体的DNA一般不整合到植物细胞核DNA上,不影响植物基因组的其他功能基因的表达.
植物基因工程病毒载体存在的缺陷:
病毒载体不能把携带的外源基因整合到寄主染色体上,不能按孟德尔规律传递给后代;
病毒载体仍然存在致病的可能性,可能会诱发植物产生病害;
病毒载体本身的不稳定性,病毒载体中的外源基因很容易丢失;
病毒基因组发生突变的频率也很高.
二质粒载体
格兰阴性菌
土壤杆菌属(特征是能够诱发植物产生肿瘤)
根瘤菌属
在根瘤土壤杆菌中,决定冠瘿病的质粒TI质粒,在毛根土壤杆菌中,,,并再生出能够表达外源基因的转基因植物.
笫二节根癌农杆菌TI质粒
TI质粒是根癌农杆菌染色体外的遗传物质,为双股共价闭合的环状DNA分子,约有150 200KB.
章鱼碱型
胭脂碱型
农杆碱型
农杆菌素碱型(琥珀碱型)
在章鱼碱和胭脂碱型TI质粒DNA分子中,都含有控制肿瘤诱发的两种基因区段:
T区段~在肿癌形成期间,从根瘤土壤杆菌的TI质粒上导入植物细胞的DNQ片段,约为23KB.
和毒性区段~在细菌中表达的数个致瘤基因,与T区段从细菌转移到植物细胞的遗传有关.