文档介绍：大鼠蛋白激酶 C( PKC ) 酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中蛋白激酶 C( PKC )的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠蛋白激酶 C( PKC ) 水平。用纯化的大鼠蛋白激酶 C( PKC ) 抗体包被微孔板, 制成固相抗体, 往包被单抗的微孔中依次加入蛋白激酶 C( PKC ) ,再与 HRP 标记的蛋白激酶 C( PKC )抗体结合,形成抗体- 抗原- 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的蛋白激酶 C( PKC ) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm 波长下测定吸光度( OD 值), 通过标准曲线计算样品中大鼠蛋白激酶 C( PKC )浓度。试剂盒组成: 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置保存说明书 1份1份封板膜 2 片( 48)2 片( 96) 密封袋 1个1个酶标包被板 1× 481× 96 2-8 ℃保存标准品: 180n mol /L ×1瓶 ×1瓶 2-8 ℃保存标准品稀释液 ×1瓶 ×1瓶 2-8 ℃保存酶标试剂 3 ml ×1瓶6 ml×1瓶 2-8 ℃保存样品稀释液 3 ml ×1瓶6 ml×1瓶 2-8 ℃保存显色剂 A液3 ml ×1瓶6 ml×1瓶 2-8 ℃保存显色剂 B液3 ml ×1瓶6 ml×1瓶 2-8 ℃保存终止液 3ml ×1瓶 6ml ×1瓶 2-8 ℃保存浓缩洗涤液( 20ml × 20 倍) ×1瓶( 20ml × 30 倍) ×1瓶 2-8 ℃保存样本处理及要求: 1. 血清: 室温血液自然凝固 10-20 分钟, 离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清: 检测分泌性的成份时, 用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/ 分) 。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS ( - )稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融, 以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分钟左右( 2000-3000 转/分) 。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本: 切割标本后, 称取重量。加入一定量的 PBS , 。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃的温度。加入一定量的 PBS ( ) ,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分) 。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献