文档介绍：生物选修三知识点
专题一 基因工程
一、基因工程的概念及基本工具
1、概念：
操作环境：体外
操作水平：
原理:
优点：定向改造生物性状
2、基因工程的基本工具
（1)“分子手术刀”:
1)来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。
2）功能：能够识别双链ＤNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有专一性。
3)结果：经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式：
２。“分子缝合针”——DNA连接酶
常用类型
Ｅ·ｃoｌiDNＡ连接酶
T4—ＤＮＡ连接酶
来源
T4噬菌体
功能
连接黏性末端
连接
结果
缝合被限制酶切开的两个核苷酸之间的
３。“分子运输车”——载体
(1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DN***段插入.
③具有标记基因，供重组ＤＮA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是
它是一种裸露的、结构简单的、独立于 之外，并具有 能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体： 噬菌体的衍生物、 等
二、基因工程的基本操作程序
（一）、目的基因的获取
1．目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。
２。获取方法：从基因组文库中获取、利用 扩增目的基因、利用 人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
３。PCR技术扩增目的基因
(1）原理：
（２）过程：
第一步：加热至90～９5℃ＤＮＡ解链；
第二步：冷却到55~６０℃,引物结合到互补ＤNA链；
第三步：加热至70～75℃，热稳定ＤNA聚合酶从引物起始互补链的合成.
（二）、基因表达载体的构建
：使目的基因在受体细胞中 ，并且可以遗传至下一代,使目的基因能够 和发挥作用。
:目的基因、 、 、 等
(1)启动子:是一段有特殊结构的ＤN***段，位于基因的 ,是 识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRＮA，最终获得所需的蛋白质。
(２）终止子：也是一段有特殊结构的DN***段 ,位于基因的 。
（3）标记基因的作用：是为了 受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细
胞 出来。常用的标记基因是抗生素基因。
（三）、将目的基因导入受体细胞
1。转化的概念：
是目的基因 内，并且在受体细胞内维持 的过程.
２。常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞： 、基因枪法、花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞: ，受体细胞多是 。
将目的基因导入微生物细胞:先用 处理细胞,使其成为 ，再将 重组表达载体ＤNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收ＤNA分子，完成转化过程。
原核生物作为受体细胞的原因是:
（四）、目的基因的检测和表达
1、检测:分子水平
检测是否有目的基因：ＤNA分子杂交技术
( +转基因生物 ）
检测 目的基因是否转录:分子杂交技术
（DNA探针+转基因生物 )
检测 目的基因是否翻译：
2、鉴定： 个体水平。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
三、基因工程的应用
１。植物基因工程：培育抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。
2。动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物，用转基因动物作
的供体
3．基因治疗:把 导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用