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麦芽糖maltose酶联免疫分析.docx

上传人:江湖故人 2021/2/11 文件大小:15 KB

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麦芽糖maltose酶联免疫分析.docx

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文档介绍

文档介绍:麦芽糖(maltose^)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T
20pg/ml-480pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定牛奶样本中麦芽糖( maltose)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中麦芽糖( maltose)水平。用纯化的麦芽糖
(maltose)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入麦芽糖 (maltose),
再与HRP标记的麦芽糖(maltose)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底 洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最 终的黄色。颜色的深浅和样品中的麦芽糖( maltose)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下
测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中麦芽糖( maltose)浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml X 1 瓶
7
终止液
6ml x 1 瓶
2
酶标试剂
6ml X 1 瓶
8
标准品(960pg/ml)
X 1 瓶
3
酶标包被板
12孔X 8条
9
标准品稀释液
X 1 瓶
4
样品稀释液
6ml x 1 瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml x 1 瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml x 1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于 -20 C保存,但应避免反复冻融
不能检测含 NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
480pg/ml
5号标准品
150 U
的原倍标准品加入150 pl标准品稀释液
240pg/ml
4号标准品
150 U
的5号标准品加入150标准品稀释液
120pg/ml
3号标准品
150 U
的4号标准品加入150标准品稀释液
60pg/ml
2号标准品
150 U
的3号标准品加入150标准品稀释液
30pg/ml
1号标准品
150 U
的2号标准品加入150标准品稀释液
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂, 其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50此待测样品孔中先加样品稀释液 40此
然后再加待测样品10 U (样品最终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置 37 C温育30分钟。
配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸储水 30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂 50 4,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂 A50 4,再加入显色剂 B50U,轻轻震荡混匀,37 C避光显色 15分钟.
终止:每孔加终止液 50 pl,终止反应(此时蓝色立转黄色