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文档介绍

文档介绍:15:39:11
纸层析和柱层析法 薄层色谱
高效毛细管电泳
超临界流体色谱
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纸层析
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一、纸层析分离过程
纸层析也属于色谱分析法。但与其它色谱方法不同的是在分离过程中一般不使用动力源。
纸层析流动相的移动是依靠毛细作用。
将试样点在色谱滤纸或层析板的一端,并将该端浸在作为流动相的溶剂(常称之为展开剂)中,随着溶剂向上的移动,经过试样点时,带动试样向上运动。
Rf 值相差越大,分离效果越好
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二、操作技术

特制的色层滤纸。按需要剪裁成长条形(或筒型)。层析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂(硅胶或氧化铝,200~250目)均匀地涂在长条形玻璃板上(~)。干燥后即可使用。
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由一种或多种溶剂按一定比例组成。如用纸层析分离氨基酸时,常用的展开剂组成和配比为:正丁醇:乙酸:水=4:1:1。
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3. 点样
用微量注射器或玻璃毛细管吸取一定量试样点在原点上。试样点的直径一般应小于5mm。可并排点多个试样同时展开。
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、检测
有些组份在紫外光照射下产生荧光,可在紫外灯下用铅笔将组份斑点描绘出来。常用的显色方法有喷洒显色剂、碘蒸气熏或氨水熏等。
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三、特点及应用
平板色谱简单、方便、及操作费用低,
可以在一块层析板上同时展开多个试样及将多条滤纸同时展开。
采用方形薄层板还可以方便的进行二维展开,即按一般方法展开后,改变方向和展开剂再次展开,进一步改善分离效果。
试样一般不需要经过预处理即可分离。
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缺点: 分离效率较低,不适用挥发性试样分离。定性定量不便。
应用:平板色谱法在染料、农药、医药、有机酸碱类化合物、糖类化合物、氨基酸、蛋白质及中草药中有效成分的分离分析中经常被使用。也可以用于无机离子的分离。还经常作为高效液相色谱的一种预试方法。
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柱层析