文档介绍：选修3知识点复习
专题1   基因工程
一、基因工程的概念
基因工程又叫 或 。原理是 ，操作水平是 水平。优点： ； 地改造生物的遗传性状。
二、基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——
（1）来源：主要从 中分离纯化出来。
（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开
（3）特点具有 性。 （4）结果：产生： 和 。
2.“分子缝合针”——
（1）两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合 。
②区别：E·coliDNA连接酶只能连接 末端；T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效较 。
（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将 加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——
（1）载体具备的条件：①能够稳定保存并 ；②有一至多个 酶切位点
③含有 ，便于筛选。④对受体细胞无害。
最常用的载体是 ，化学本质是 。（3）其它载体：
三、基因工程的基本操作程序
（一）▲获取目的基因
1、从基因文库中获取目的基因
2、利用PCR（是 的缩写）技术扩增目的基因
PCR技术与DNA复制比较：相同点：原理 、原料 。
PCR技术
DNA复制
不
同
点
解旋方式
加热
DNA解旋酶
场所
体外
活细胞中
酶
热稳定DNA聚合酶
DNA聚合酶等
（2）过程：第一步 ：加热至90～95℃，DNA ，不需要解旋酶；第二步 ：冷却到55～60℃， 结合到互补DNA链。变性和复性利用了DNA的热变性原理；第三步 ：加热至70～75℃， 从引物起始互补链的合成。
3、化学方法直接人工合成目的基因。适用范围：基因比较 ，又已知 。
（二）▲基因表达载体的构建——基因工程的核心
1、基因表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中 ，并可以 给下一代,同时使目的基因能够 和发挥作用。
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