面条中还原糖的测定.ppt

文档介绍：面条中还原糖的测定一、实验目的?掌握还原糖的测定原理?学****用比色法测定还原糖的方法?了解紫外可见分光光度计的使用方法二、实验原理?在氢氧化钠和丙三醇存在的条件下,还原糖能将 3,5- 二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基,生成橘红色的化合物,其最大吸收波长为 540nm ,在一定的浓度范围内其吸光度与还原糖浓度成正比,符合朗博比尔定律定律,故可进行定量分析。三、仪器与试剂?仪器: 1000mL 容量瓶、 100mL 容量瓶、十万分之一分析天平、电子天平、玻璃棒、具塞试管、比色管、水浴锅、紫外- 可见分光光度计、石英吸收池、研钵、 100mL 烧杯、量筒?试剂:面条、 80% 乙醇、氢氧化钠、丙三醇、 3,5- 二硝基水杨酸、葡糖糖、盐酸、蒸馏水四、操作步骤 :称取 20g 样品, 置于 250mL 容量瓶中,加入 200mL 水,在 45 摄氏度水浴中加热 1h , 并不时振摇,冷却后加水至刻度, 混匀,静置,沉淀。吸取 200mL 上清液于另一 250mL 容量瓶中。四、操作步骤 2. 3,5- 二硝基水杨酸溶液的制备: 称取 3,5- 二硝基水杨酸溶于少量水中,移入 1000mL 容量瓶中加入 2moL/L 氢氧化钠溶液 325mL , 再加入 45g 丙三醇,摇匀,冷却后定容至 1000mL 。四、操作步骤 3. 10mg/mL 葡萄糖标准溶液的制备: 准确称取 在 100 干燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后移入 100mL 容量瓶中,加入 盐酸(防止微生物的生长),用水稀释至 100mL 。四、操作步骤 : 在5支 10mL 具塞试管中,分别加入 10mg/mL 葡萄糖标准溶液 1、2、3、 4、 5mL ,定容,得到一组浓度分别为 1、2、3、4、 5mg/mL 的葡糖糖系列标准溶液。四、操作步骤 : 取1、2、3、4、5、 mg/mL ,置于干燥的 25mL 比色管中,各加入 3,5- 二硝基水杨酸溶液 2mL ,置于沸水浴中 2min, 显色,然后以流动水迅速冷却,用水定容到 25mL ,摇匀,以蒸馏水为空白对照,在 540nm 处测定其吸光度,绘制标准曲线,计算回归方程。四、操作步骤 : 取样液 1mL ,分别置于干燥的 25mL 比色管中, 3,5- 二硝基水杨酸溶液 2mL ,置于沸水浴中 2min ,显色,然后以流动水迅速冷却,用水定容到 25mL, 摇匀,以蒸馏水作为空白对照,在 540nm 处测定其吸光度,算出吸光度平均值,代入回归方程,计算样品中还原糖的含量。