文档介绍:实验2 特殊显微镜及其使用
暗视野显微镜
相差显微镜
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一、实验目的
、了解其构造
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二 暗视野显微镜的原理及构造
根据丁达尔效应原理设计的一种在黑色背景条件下观察被检物体的显微镜
观察到明场看不到的极其微小的物体
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原理
丁达尔现象:在日常生活中,室内飞扬的微粒灰尘是不易被看见的,但在暗的房间中若有一束光线从门缝斜射进来,灰尘便粒粒可见了,这就是微粒发光。
暗视野显微镜就是利用微粒发光原理设计的。
结构特点
使用中央遮光板或暗视野聚光器(常用的是抛物面聚光器),使光源的中央光束被阻挡。不能由下而上地通过标本进入物镜。从而使光线改变途径,倾斜地照射在观察的标本上,标本遇光发生反射或散射,散射的光线投入物镜内,因而整个视野是黑暗的。
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暗视野显微镜原理
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成像特点及优缺点
在暗视野中所观察到的是被检物体的衍射光图像,并非物体本身,所以只能看到物体的存在和运动,不能辨清物体的细微结构。但被检物体为非均质时,并大于1/2波长,则各级衍射光线同时进入物镜,在某种程度上可观察物体的构造。
一般暗视野显微镜虽看不清物体的细微结构,,这是普通显微镜()所不具有的特性,可用以观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。
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应用:微小粒子、细菌形态、细菌记数,透明标本观察等。
暗场显微镜的要求
要求载玻片和盖玻片必须无疵痕和灰尘
物镜前透镜必须清洁无尘
载玻片和盖玻片厚度必须绝对符合要求
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暗场观察方式调节
(1)换上暗场聚光镜。
(2)将视场光阑适当缩小,用10X物镜找到被检物体,同时在视场中看到视场光圈的轮廓象。上下缓慢调整聚光镜,使视场光圈像清晰可见。
(3)视场光圈如不在视野中央,可利用聚光镜外侧两个调节螺丝进行调整,再将其开大到相应位置。
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自己动手制作暗视野显微镜
暗视野光挡
(左:金属片或厚卡纸制成; 右:透明滤色镜贴黑纸制成)
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三、实验用品
:口腔黏膜上皮细胞、洋葱内表皮细胞
:生理盐水、蒸馏水
:载玻片、盖玻片、显微镜、擦镜纸等
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