文档介绍：HPLC法测定水飞蓟素中各主要成分的含量
摘要　　目的：建立一种测定水飞蓟素中各主要成分含量的HPLC方法。方法：使用岛津LC-20A型高效液相色谱仪；色谱柱：Betasil C18（×250mm，5μm）；流动相：甲醇－水－冰乙酸（：：）；检测波长：288nm；流速：·min-1；柱温：25℃。结果：～·mL-1范围内线性关系良好（r=),％，％，％；％，％，％。结论：本方法操作简便、准确、重复性好，适用于水飞蓟素中各主要成分的定量分析。
关键词：HPLC；水飞蓟素；水飞蓟宾A、B；水飞蓟亭；水飞蓟宁；异水飞蓟宾A、B；
　　水飞蓟素为菊科植物水飞蓟（紫花）[silybum marianum(Linn) Gaertn]的果实，经提取精制所得的淡黄色或黄色粉末，或结晶性粉末。无味、无臭。在热甲醇中溶解，乙酸乙酯中微溶，不溶于水，主要化学成分为水飞蓟亭（silychristin）、水飞蓟宁(silydianin)、水飞蓟宾(silybin)C25H22O10及其异构物等黄***类物质。水飞蓟素具有保肝及降血脂作用，用于治疗慢性肝炎，早期肝硬变、代谢中毒性肝损伤及高血脂症，对人体无任何副作用。本实验采用HPLC法对水飞蓟素中水飞蓟亭、水飞蓟宁、水飞蓟宾A、B和异水飞蓟宾A、B进行测定，为该原料药的质量控制提供科学的依据。
1　仪器与试药
　　岛津LC-20A型高效液相色谱仪，紫外可见检测器，赛多利斯BT25S电子天平()，DC-DS2060型超声清洗器，上海亚荣生化仪器厂SZ-93型自动双重纯水蒸馏器。
　　HPLC级甲醇（TEDIＡ公司，批号：Lot608012)；HPLC级冰乙酸（sigma公司，批号：2014807）；对照品水飞蓟亭、水飞蓟宁、水飞蓟宾均购自美国sigma公司，供试品水飞蓟素为本公司生产（批号为140429）。
2　色谱条件
　　色谱柱：大连Elite公司Betasil C18（×250mm，5μm）；流动相：甲醇－水－冰乙酸（：：）；检测波长：288nm；流速：·min-1；进样量：5μl；柱温：25℃。
3　溶液制备
　对照品溶液　（定性）分别精密称取对照品水飞蓟亭、，置10mL量瓶中，加适量甲醇，超声15min，甲醇定容，振荡均匀。，置100mL量瓶中，加适量甲醇，超声10min，甲醇定容，振荡均匀，·mL-1的对照品溶液。，，，，·mL-1的系列对照品溶液。
　供试品溶液　，置50mL量瓶中，加甲醇适量，超声15min，甲醇定容，振荡均匀。精密量取该溶液5mL置50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。用微孔滤膜（）滤过，取续滤液即得。
4　系统适用性试验
　　·mL-1的水飞蓟宾对照品溶液5μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件记录色谱图，见图Ｃ，按水飞蓟宾峰计算理论板数为5000以上