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血糖的测定及激素对血糖浓的影响.pptx

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上传人:wz_198613 2021/2/28 文件大小:1.32 MB

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文档介绍

文档介绍:一 实验目的
掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。
观察胰岛素,肾上腺素对血糖浓度的影响。
了解动物实验的基本知识和兔耳缘静脉取血的方法。
二 原理
(2) 激素对血糖浓度的影响
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢被过氧化物酶(POD)催化释放初生态氧,氧又对与色原性氧受体4-氨基安替比林偶联的酚氧化,并与4-氨基安替比林结合生成红色醌类化合物。
二 原理
(2) 显色原理
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢被过氧化物酶(POD)催化释放初生态氧,氧又对与色原性氧受体4-氨基安替比林偶联的酚氧化,并与4-氨基安替比林结合生成红色醌类化合物。
葡萄糖+O2+H2O GOD 葡萄糖酸+H2O2
4-氨基安替比林+酚+H2O2 POD 红色醌类化合物 +4H2O

葡萄糖越多,生成的醌类物质就越多,颜色就越深,通过所讲过的比色法,求出它的葡萄糖含量,即血糖浓度。(标准管法)
三 操作
1.准备抗凝试管:首先放入试管一小勺抗凝剂(草酸钠)。
2.分组。称重:Kg,共有四只兔子,两只注射胰岛素,两只注射肾上腺素。兔子抓取方法:一手抓取颈部皮肤,另一只手托臀部,把它放在天平上称重。
操作
3. 注射前取血:一般多以心脏取血的方式进行。
操作
4.注射激素:抓住兔子,肚皮朝上,在腹部的皮下注射,注意要抓紧兔耳以免被咬住,方法是掂起皮肤,刺入皮下有落空感,然后缓慢注入激素。 mg/kg(注意记录时间) mg/kg,并记录时间。
5.制备无蛋白血虑液:这是注射前的血液,在胰岛素等待一个小时,肾上腺素等待半个小时期间制备注射前无蛋白血虑液。方法:蛋白沉淀剂4ml+,室温放置7分钟后,在漏斗上过滤,这时标记为注射前无蛋白血滤液。
操作
6.注射后再次取血
7.再制备无蛋白血虑液:标记为注射后
8.比色:最后我们用标准管法来测定血糖浓度, 按表操作:
混匀,置37℃水浴15分钟调波长为505nm,以空白管调零,分别读取A测A标,根据标准管法求测定管血糖浓度。
加入物(ml) 测定管(注射前) 测定管(注射后) 标准管 空白管
去蛋白血滤液
处理后的葡萄糖
标准应用液
蛋白沉淀剂
酶酚混合试剂 3 3 3 3
四 结果与计算
C测(mmol/l)= (A测/A标)×5 mmol/L (5为葡萄糖标准应用液浓度值)
通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变化情况。

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