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文档介绍：现代食品检测技术第二部分
第12章 核酸探针检测技术
赵杰文 邹小波
江苏大学食品与生物工程学院
第十二章核酸探针检测技术
ƒ 1 核酸探针的种类及其制备方法
ƒ 2 探针标记物与标记方法
ƒ 3 探针杂交与信号检测
ƒ 4 核酸探针在食品微生物检测中的应用
1核酸探针的种类及其制备方法
ƒ一、基因组DNA探针
ƒ二、cDNA探针
ƒ三、RNA探针
ƒ四、寡核苷酸探针
一、基因组DNA探针
ƒ这类探针多采用分子克隆或PCR技术从基因
文库筛选或扩增方法制备。
二、cDNA探针
ƒcDNA探针是以RNA为模板，在反转录酶的作
用下合成的互补DNA，因此它不含有内含子及
其他非编码序列，是一种较理想的核酸探针。
三、RNA探针
ƒmRNA作为核酸分子杂交的探针是较为理想
四、寡核苷酸探针
ƒ用人工合成的寡聚核苷酸片段作为分子杂交的
探针，其优点是可根据需要随心所欲地 合成相
应的序列，避免了天然核酸探针中存在的高度
重复序列所带来的不利影响
2 探针标记物与标记方法
ƒ一、核酸探针标记物种类及其特点
ƒ二、探针标记方法
ƒ三、探针的纯化
ƒ四、探针标记效率的评估
一、核酸探针标记物种类及其特点
ƒ标记探针的目的是为了跟踪探针的去向，确定
探针是否与相应的基因组DNA杂交
一、核酸探针标记物种类及其特点
ƒ一种理想的探针标记物，应具备以下几种特
性：1、高度灵敏性；；2、标记物与核酸探针
分子的结合 ；；3、应不影响探针分子的主要
理化特性 ；4、当用酶促方法进行标记时，应
对酶促活性(Km值)无较大的影响 ；5、检测方
法除要求高度灵敏性外，还应具有高度特异性