文档介绍：摘要在进行同源性检索还发现:在核酸序列水平上,抽与家蚕类型的家蚕的胰凝乳蛋白酶抑制剂珻在维持家蚕的正常生长发育中具有重要作用。迄今为止,人们已经对其遗传规律、在染色体上的定位、分离纯化、强白的基本理化性质、基因组序列和结构、表达谱、表达调控和生理功能等方面进行了较为详细的研究。在此基础上,本文首先调查分析了家蚕在品系间的多态性分布;其次利闰己知的基因信息,克隆并分析了一个新的家蚕基因:然后,结合家蚕全基因组序列信息对家蚕基因群进行了综合分析。本研究利用非变性聚丙烯酰***凝胶猵日电泳对黾也掀分值难R篶植冀辛说鞑椋峁砻鳎编码的龌騦、虸在所有品系中均表达,表明它们对家蚕的正常生长发育是必要的;銎废得挥谢騃和谋泶铮庑┢废瞪し⒂喽曰郝ú⒚挥兄大的生理缺陷;⑶褻通常和—鸨泶铮.、.通常和.’一起表达,基于.、.、虲在带形和表达上的一致性,推测ξ猚痑,一为痓;褂萌砑﨑将个纯晶系的电泳结果进行聚类分析,发现聚类结果与其系统、眠性和化性没有明显的相关性。各种广泛存在于不同家蚕品系中,可能与家蚕基本的生理生化相关。根据家蚕甋膍杓埔铮蛹也掀废幕蜃镈和中克隆了一个新的基因。对其基因结构进行分析,发现克隆的基因组序列共含有鐾庀子和瞿诤樱庀宰雍湍诤颖呓绶系湫偷腉结构,。克隆的基因开放阅读框长度为,编码个氮基酸,前个氨基酸残基为信号肽。预测成熟蛋白质的分子量为.,等电点为J褂肧在线程序预测蛋白质结构域,显示该蛋白含有一个典型的结构域。与家蚕其他同类型的相比,具有鯿J氐陌腚装彼岵谢钚位点为牖颍痗嗦氲腃的活性位点相同。在进行同源性检索,结果显示所克隆的基因与家蚕胰凝乳蛋白酶抑制荆同潺。因此此次克隆的基因为一个新的类型的基因,命名为.。—治龇⑾諧在家蚕一闹咎濉⒕ǔ病⒙巢、马氏管、气管和中肠鲎橹斜泶铮谒肯佟⒀O赴吞灞谥忻挥斜泶铮且桓组织特异性表达的基因。其他的类型的也是组织特异表达的。.、.和畇葱苑直鹗ァズィ涸诎被嵝蛄兴剑隒.、%、%、%、%.与类型不论在核酸或蛋白水平都显示出高度的同源性,暗示它们可能来源%·该结果表明中文摘
与拍对应的电泳带。,这可能是由于活性序列数据库进行检索,分析确认了家蚕品种大造中.、对家蚕的阻液进行⑾,而·与一虲陌被嵝蛄卸疾幌嗤虼瞬⒚挥性贜琍慕峁蟹⑾位点前面两个氨基酸残基的变化,特别是少了一个半胱氨酸残基,引起其构象变化,导致了对胰凝乳蛋白酶抑制活性的丧失。在家蚕全基因组序列的基础上,,基因序列,<<允綜可能参与家蚕发育和变态等重要生命过程。同时基于的基因表达谱分析,发现、·虲谖辶涞谌熘咎逯衅鋗泶锪显著高于其它组织时期。是家蚕基本生理生化反应的酶类,其丰富的多态性及组织表达的特异性为我们提供了很好的研究蛋白质功能及其相豆作用的模式。本研究对其多态性的研究、基因克隆与分析以及在基因组水平上的综合分析,为迸一步深入阐明在家蚕中的具体生物功能提供了重要参考,而且能够推进我们对家蚕生理生化的了解。关键词家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂多态性基因于相同的基因。列和西南农业大学硕士学位论文
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第一章文献综述胰凝乳蛋白酶抑制荆的研究进展稳定吐Ⅱ胰凝乳蛋白酶再作用于其他的Ⅱ胰凝乳蛋白酶上,使其失去两个二肽,、热槊福且认俜泌的一种蛋白水解酶,能迅速分解变性蛋白质。胰凝乳蛋自酶是一种肽链内切酶,专一地水解由芳香族氨基酸或带有较大非极性侧链的氨基酸羧基形成的肽键,即断裂和等疏水氨基酸残基的羧基端肽键,但专一性不如胰蛋白酶。如果断裂点邻近的基团是碱性的,裂解能力增强:是酸性的,裂解能力将减弱⋯。在生物体体内,首先合成的是无催化活性的胰撮乳蛋白酶酶原,在胰蛋白酶作用下,涞碾募狭眩纬筛呋钚缘膠胰凝乳蛋白酶。这种形式具有较高的活性,但不定形式,称为饶榈鞍酌浮3墒於榷ǖ腶胰凝乳蛋白酶由三条肽链组成,础链和矗珹、搅春虰、搅醇涓魍ü欢远蚣嗔浠钚灾挥孝蛞饶榈鞍酌傅ァ酶原激活过程中,蛋白构象发生改变,形成一个疏水袋,允许芳香基团和大的非极性基团结合于底物专一性部位”’。胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶都可以用于创伤或手术后伤口愈合、抗炎及防止局部水肿、积血、扭伤血肿、乳