基因诊断肝炎.pptx

文档介绍：乙型肝炎
基因诊断
乙型肝炎 病例
颜先生，男，47岁，在一家大公司任公关部经理。近两个月感觉乏力、纳差，每次应酬都不胜酒力。20天前皮肤及巩膜开始发黄。
到医院检查肝功能显示谷丙转氨酶、谷草转氨酶增高，总胆红素、间接胆红素增高，乙肝表面抗原阳性。
诊断为 乙型肝炎
公司同事知道颜先生患乙肝后，都对其敬而远之，午餐时颜先生总是形单影只，独自闷头吃饭，与以往呼朋唤友的情形反差甚大。
常规检查
基因诊断优势
乙肝病毒基因组结构
基因诊断技术
基本技术
重点技术
乙型肝炎 基因诊断
乙型肝炎 常规检查
乙肝（乙型病毒性肝炎）五项检查
乙肝（乙型病毒性肝炎）病毒DNA检测
肝功能检查
B超
甲胎蛋白(AFP)
乙型肝炎 基因诊断优势
目前研究发现，许多表面抗原阴性的异型乙肝并不少见，不少乙肝患者虽然只表现为抗体（如核心抗体，e抗体等）为阳性，但是肝功能反复异常，进一步检查乙肝病毒DNA往往为阳性，这些人也是乙肝现症感染者。
基因诊断是通过较为先进的检测技术（例如聚合酶链反应）检测出体内极其微量的乙肝病毒DNA基因，是一种新的检验方法。乙肝病毒DNA是乙肝病毒复制的发动机。
乙型肝炎 基因组结构
双链缺口环型DNA，，分为正、负链。 负链为长链，长度固定；正链为短链，长度可变。在粘性末端各有11bp组成的直接重复（DR）序列，分为DR1和DR2区。
乙肝病毒基因组DNA有四个开放读码框架（ORFs），分别为S、C、P和X区，其中P区分别与S、C和X区相互重叠。
乙型肝炎 基本技术
斑点杂交
原位杂交
DNA印迹和RNA印迹杂交技术
核酸电泳
聚合酶链式反应（PCR）
基因芯片
核酸杂交
乙型肝炎 重点技术
聚合酶链式反应
反向斑点杂交
生物芯片技术

乙型肝炎 重点技术之一
PCR扩增HBV 基因特征序列检测乙肝病毒DNA
PCR扩增HBV基因特征序列
检测乙肝病毒DNA
聚合酶链式反应（PCR）作为一种简便高效的基因扩增技术，具有极高的检测灵敏度和特异性，通过扩增并检测HBV DNA保守区的一段特殊序列而达到对乙肝病毒的检测目的。
相对于常规的PCR检测方法，荧光定量PCR克服了假阳性缺点，能对HBV-DNA实时定量测定。
PCR检测中的要点
引物是决定PCR产物是否特异，反应能否成功进行的关键。设计引物有如下原则
乙型肝炎 重点技术之一