文档介绍：3
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仲恺农业技术学院学报,16(4) :64~71 ,2003
Journal of Zhongkai Agrotechnical College
文章编号:1006 - 0774(2003) 04 - 0064 - 08
植物原生质体培3 养和体细胞融合
技术研究进展
李杰1 ,2 , 黄敏仁1 , 王明庥1 , 蔡汝2
(1. 南京林业大学林木遗传和基因工程国家林业局重点实验室,江苏南京 210037 ;
2. 江苏省兰花工程研究中心,江苏泰州 225321)
摘要:自 20 世纪 70 年代以来,植物原生质体培养和体细胞融合操作技术不断趋于精密化、微量
化、高效化与多样化. 文章侧重于实验操作技术和当前研究热点,对植物原生质体培养和体细胞
杂交等关键技术环节的重要研究成果和研究进展进行了综述,并对其在理论和实践上的应用前
景及未来发展趋势进行了展望.
关键词:植物; 原生质体培养; 体细胞融合; 研究进展
中图分类号:S682. 31 文献标识码:A
植物原生质体培养和体细胞融合技术作为细胞工程技术的重要分支,一直是 20 世纪 70
年代以来的研究热点. 30 多年来,随着一系列关键性实验方法的发展和技术难关的逐步突
破,原生质体培养和体细胞融合技术己广泛应用于生物科学众多领域的研究,尤其是在通过
这样的实验体系进行植物品种改良和创造远源杂种方面取得了可喜的进展. 近年来有关该
领域的研究综述颇多,但大多是针对某一具体植物研究结果的总结,而针对更具普遍指导意
义的操作技术评述较少. 结合国内外有关文献,侧重于实验操作技术,作者对植物原生质体
培养和体细胞杂交等关键技术环节的重要研究成果和研究进展进行综述,以期为相关领域
的研究提供参考.
1 植物原生质体的培养
据许智宏等[1 ]介绍,自从 1971 年 Nagata 和 Takebe 首次利用烟草叶片分离原生质体,并
培养获得再生植株以来,迄今至少已有 46 个科 160 多个属的 360 多种植物(含变种和亚种)
的原生质体再生植株问世.
1 1 植物原生质体的游离
原生质体的游离是原生质体培养成功的一个重要环节. 目前,游离植物原生质体的常
收稿日期:2003 - 04 - 23
基金项目:国家“863”高技术研究计划(2001AA244011) 资助项目.
作者简介:李杰(1974 - ) ,男,四川巴中人,在读博士生. 通信作者.
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第 4 期李杰,等:植物原生质体培养和体细胞融合技术研究进展 56
规方法是酶解法. 用酶解法游离原生质体时,首先要考虑植物材料的正确选择. 一般情况
下,当植物处于最佳生长状态时取材,分离的效果最为理想. 如茄科植物一般选取生长旺
盛、生理状态一致的试管苗上部叶片[2 ] ,而禾本科植物大多数选取胚性悬浮细胞系为材
料[3 ] . 一个处于指数期快速生长的细胞培养体系,如愈伤组织或悬浮培养物,最适宜作为游
离原生质体的材料.