第14章细胞融合和单抗的杂交瘤技术.pdf

文档介绍：第14章细胞融合和单抗的
杂交瘤技术
第一节细胞融合
ƒ 细胞融合:即两个或两个以上细胞合并成一
个细胞的过程,即将两个离体细胞在特殊融
合剂的作用下使细胞膜发生一定变化,使
两个或多个细胞发生融合,形成体细胞杂
交(Somatic Hybridization),产生一个新
的杂种细胞(Hybrid) 。
ƒ 融合剂种类见表14-1
表14-1 细胞融合剂
DNA病毒:水痘和疱疹病毒,天花
病(兔天花)病毒
毒 RNA病毒:仙台(HVj)病毒,NDV,腮
类腺炎病毒,SV5,麻疹及呼吸道合胞病毒
RNA致癌病毒:Rous肉瘤病毒,Visna
病毒
冠状病毒:禽类感染性气管炎病毒
化水溶性:聚乙二醇(PEG)、二甲亚
合砜(DMSO)、ConA
物脂溶性:溶血卵磷脂、磷脂酰丝氨酸
生物制剂昆虫Paederus,fuscipes提取物
细胞融合方式:
ƒ (一)完整细胞之间的融合
ƒ 两种亲本细胞之间的融合成的杂种细
胞,保留双亲染色体,具有双亲的特
性。
ƒ (二)核体、胞质体与完整细胞的融
合作用
将核体与完整细胞或另一胞质体
融合构成的杂种细胞,也可使胞
质体/完整细胞或胞质体中的线粒
体、mRNA移至完整细胞,使完
整细胞获得新的特性。
ƒ (三)微小细胞与完整细胞的融合:
采用秋水仙碱和CB脱核处理所获
得的微小细胞(胞质体包裹一个
或多个染色体将微小细胞和完整
细胞融合成杂种细胞,改变完整
细胞的特征)。
ƒ (四)脂质体介导的细胞融合:
–细胞器/DNA(RT-PCR产物)用
脂质体包装后与另一个完整细胞
融合。
第二节单克隆抗体的杂
交瘤技术
ƒ 一、 McAb技术基本原理
ƒ 通过改变B淋巴细胞的遗传特性
而建立一个能永久生长,并能分
泌McAb的杂交瘤细胞系。
其方法为:
(1)病毒转化: 常通过EB病毒对B细
胞进行转化。
(2)细胞杂交:将分泌特异抗体的B
细胞和某一个永生化的骨髓瘤细胞
系进行融合,杂交后代称之为杂交
瘤。
二、 McAb技术的特点
1、高度特异性
2、高度稳定性
3、高抗体活性
4、不可知性
5、过于单一性