第22章常用技术2.ppt

文档介绍：第二十二章
常用分子生物学技术的原理及应用
The Popular Technology in Molecular Biology: Principle and Application
技术对理论的推进:X射线衍射技术对DNA双螺旋结构发现的作用.
1952年,富兰克林用X线拍下了DNA分子结构的B型照片,经证明: ,
,表示了螺旋旋转一周的距离

第一节分子杂交与印迹技术Molecular Hybridization & Blotting Technology
核酸分子杂交(nucleic acid hybridization )
在DNA复性过程中,如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中,或把DNA与RNA放在一起,只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系,就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex) 。
一、分子杂交与印迹技术的原理
复性
RNA
DNA
(一)印迹技术
(二)探针技术
探针(probe)
一小段用同位素、生物素或荧光染料标标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸,与固定在NC膜上的核苷酸结合,判断是否有同源的核酸分子存在。
探针
标记物
标记探针
靶核酸
杂交体
二、印迹技术的类别及应用
(一)DNA印迹技术(Southern blotting)
用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。
(二)RNA印迹技术(Northern blotting)
用于RNA的定性定量分析。
(三)蛋白质的印迹分析(Western blotting)
用于蛋白质定性定量及相互作用研究。
Agarose Gel stained with Ethidium
Bromide, Visualized By UV
其他
斑点印迹(dot blotting)
原位杂交(in situ hybridization)
DNA点阵(DNA array)
DNA芯片技术(DNA chip)