文档介绍：第24章干扰素和其它细胞因子的
生产制备技术
一、细胞来源:
•由各市中心血库提供的人外周血,经血浆
分离后的血细胞黄层。
•要求:HBsAg阴性、HCV抗体阴性、肝功
能正常。
•4℃存放,不得超过24~48小时。
二、生产设备:
•我国大多采用自制的“诱导搅拌装置”,结
构较简单,成都生物制品所采用不锈钢发
酵罐进行大量生产。
•本章将介绍大罐悬浮培养法生产人白细胞
干扰素(粗品)。
三、质量控制:
•按国家标准进行严格检查,如无菌试验、
热源试验、毒性试验、安全试验、HBsAg
、HCV等各项指标进行检测,阴性者为合
格,确保制品的安全有效性。
•两个106(106IU/ml、106IU/毫克蛋白)
。
四、大罐悬浮培养法生产干扰素
IFN-α
•旋转、震荡、搅拌、旋摇、发酵罐法:
人外周血、脐血、扁桃体、脾脏
Æ Æ白细胞淋巴细
%NH4Cl /Ficoll /
胞—先启动,后加诱生剂NDV-FÆ35℃
诱导培养、22hrÆ收获培养上清,经酸化
/中性化Æ粗品
第二节人成纤维细胞干扰素(IFN-
β)的生产制备
•从大规模角度考虑,采用多层培养或微载
体培养可达经济、简便和高产的目的
生产用细胞来源:
•鼠源性IFN-β常用鼠L929细胞,人源性
IFNβ是用二倍体细胞,如人胚肌皮纤维
细胞、人胚肺细胞等,最常用的是人包皮
细胞FS4和FS35纤维细胞(传代细胞)。
二、细胞培养装置:
(一)转瓶培养方法
(二)微载体培养法
(三)多层培养法
•转瓶系统(roller bottle system)是将
250ml或更大的盐水瓶或培养瓶,甚至是
500ml、10000ml的蒸馏水瓶,插入或
固定在带有马达转动的支架上,支架若装
250ml瓶100个,
IFNβ(×108单位),若换成大瓶产
量可逐步放大。
)
•按前面的微载体培养贴壁细胞的方法,待
细胞达饱和密度时,继续老化培养8~10
天,中间换液一次,然后按IFN-β的制备
方法进行,此制备系统可达生产规模、产
量高,成本低。
)